甘草查尔酮A体内外抗胃癌的作用及分子机制研究

胃癌是常见恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率很高，很多患者就诊时处于晚期。目前对进展期胃癌以化疗为主，但常因副作用较大，患者无法耐受。近年来天然中草药在抗肿瘤中的应用受到极大关注。我们前期工作证实甘草查尔酮A能抑制胃癌细胞的增殖，促进其凋亡。本研究拟进一步以分化程度不同的胃癌细胞株和正常胃粘膜上皮细胞株为研究对象，用一定浓度梯度的甘草查尔酮A对其处理，以化疗药物氟尿嘧啶或二者联合用药为对照组，应用MTT法、流式细胞术等观察其对细胞增殖、细胞周期及凋亡影响，用蛋白印迹、实时定量PCR方法对关键基因如Caspase3、Caspase8、CyclinA、CyclinB等在蛋白及mRNA水平观察其表达变化，阐明其抗癌机理。进而将胃癌细胞株种植于裸鼠，用LCA对其处理，研究该药物在体内的抗瘤效果及毒副作用，为甘草查尔酮A应用于胃癌的治疗提供实验基础。本研究将有望为胃癌的临床用药提供一种新的手段。

胃癌是常见恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率很高，很多患者就诊时处于晚期。对进展期胃癌治疗以化疗为主，但常因副作用较大，患者无法耐受。近年来天然中草药在抗肿瘤中的应用受到极大关注。甘草查尔酮A (Licochalcone A，LCA)是甘草中的一种化合物，分子式C21H22O4，分子量为338.39698，属于黄酮类化合物。近来研究发现LCA有很强的抗肿瘤效果，对前列腺癌细胞、结肠癌细胞具有一定的抑制作用，并有抑制结肠癌转移的作用。但缺乏LCA在人类胃癌细胞中的研究。我们的前期研究发现LCA有较强的杀伤胃癌细胞能力，并且对正常胃粘膜上皮细胞的毒性较小。通过本项目研究结果进一步显示：LCA能够明显抑制分化程度不同的胃癌细胞增殖、促进胃癌细胞凋亡和细胞周期静止，其作用机制主要和凋亡、周期相关蛋白如PARP蛋白、P53蛋白和P21蛋白等表达变化相关。但在体内的研究过程中我们发现LCA单药并未对裸鼠移植瘤有明显抗癌效果，可能和体内复杂的吸收、代谢、排泄有关；也可能是LCA这个单体成分活性本身由于体内外细胞环境不同有关，在体内并无明显抗癌效果。因此，本研究后续采用了LCA联合常用的抗胃癌化疗药物5-FU，观察在体内LCA是否能够增加化疗药物的抗癌效果、减少毒副作用，这也是很多中药单体成分真正在临床上应用的价值。结果表明，LCA联合5-FU能够增加其抑制增殖、促进凋亡疗效。总之，本项目结果初步阐明了LCA在体内外的抗胃癌作用及机制，为LCA用于胃癌的治疗提供了有力的实验基础。