云南春燥环境下小鼠动物模型的评价与研究

Yunnan spring dryness syndrome research has already achieved in epidemiology and clinical research achievements, to direct the research work to further, must carry out experiments on animals, so it is imperative to yunnan spring dryness syndrome experimental animal model. The project is in reference on the basis of the experimental animal model of TCM research, to yunnan spring dryness syndrome etiology, syndrome type of build mould processing elements and index set on the basis of observation, using artificial climate box, adjust the humidity, temperature, wind speed and other factors, to simulate the weather in yunnan climate environment caused by external causes; Mice as experimental animals, feed in normal and dry permit correlation diet, to simulate a spring dryness syndrome caused by diet internal cause in yunnan, yunnan spring dryness syndrome group building experiments. Before, during and after the mold to weight, jaw, tongue, hair, body, eyes, mainland as the examination content, such as in mice of each group constitution and syndrome "syndrome differentiation", and detect the related experiment index. After comparative analysis, and create spring dryness syndrome in yunnan experimental animal model, forming the model of syndrome and the index system.

云南春燥证研究已于流行病学与临床研究中取得阶段性成果，为将研究工作引向深入，必须开展动物实验，故建立云南春燥证实验动物模型势在必行。本项目拟在借鉴国内中医实验动物模型研究的基础上，以云南春燥证病因、证候类型为造模处理要素和观察指标设置依据，利用人工气候箱，调整其湿度、温度、风速等因素，以模拟云南天气气候环境所致外因；取小鼠为实验动物，喂以正常和燥证相关性饮食，以模拟云南春燥证饮食所致内因，进行云南春燥证分组造模实验。造模前后，以体重、爪、舌、毛、体、目、二便等为诊察内容，对各组小鼠进行体质与证候"辨证"，并检测相关实验指标。之后进行对比分析，从而创立云南春燥证实验动物模型，形成该模型之证候与实验指标体系。

云南春燥证是发生于滇中、滇西北、滇东北为代表的云南地区，以春季感受燥邪为主要病因，以口鼻、咽喉、肌肤干燥和干咳等各种症状为特征的一组中医症候。故课题组根据前期文献及临床流调学研究基础上，借鉴当前中医动物模型研究方法，以中医病因学说为指导，结合现代气象学、现代生命科学的实验方法、技术和手段。从外因，内因两方面入手，考虑造模施加的因素，模拟云南春燥证动物模型。确定模型后，选择相应检测指标体系（免疫组、水通道组），进而从微观角度解释云南春燥证的病机实质。.课题组利用人工气候箱，采用病因造模法，模拟云南春燥环境的因素（气候+饮食），对各组小鼠进行观察，发现，其生物表征等临床表现符合“燥胜则干”的云南春燥证临床表现。实验结果可见：小鼠体重、饮食、饮水量、二便含水率、皮肤含水率均出现了“燥胜则干”的表现。为进一步确认模型组小鼠符合“云南春燥”证，我们采用了以方测证的方法，验证模型建立的成功，分别设立模型组、对照组、桑杏汤组、沙参麦冬汤组、桑杏汤和沙参麦冬汤组（简称合方组），在应用药物干涉后，小鼠各临床表现均出现好转，证明模型组小鼠符合云南春燥证。.课题组在确定“云南春燥”证动物模型后，又分别对模型组小鼠的肺组织结构，小鼠肺泡灌洗液中IgA,IgG,sIgA,SP-A，小鼠气道黏蛋白MUC5ac浓度，小鼠气道水通道蛋白AQP5浓度进行测验。进一步用微观指标解释说明云南春燥证的病理机制。.实验结果：模型组小鼠造模第14天，肺组织结构发生改变，见支气管黏膜层损伤，有少许上皮细胞脱落，肺泡壁充血瘀血及少量出血，炎性细胞浸润，肺大泡；IgA浓度降低，IgG，sIgA，SP-A均显著增加，与正常对照组比较具有统计学意义。Muc5ac、AQP5浓度均降低，与正常对照组比较具有统计学意义。 结果说明，云南春燥证小鼠动物模型在肺组织结构发生了病理变化，从一个侧面证实了“燥邪”易伤肺的这一病理特点；另外；IgA，IgG，sIgA，SP-A等指标的变化提示两点内容，第一提示云南春燥证引起机体免疫系统发生变化，解释了中医认为当邪气侵袭人体，正气奋起抗邪这一病理反应；第二说明云南春燥证引起相应的炎症反应。Muc5ac、AQP5浓度均降低，提示了云南春燥证引起机体水液代谢平衡的变化，对应中医燥邪伤肺、燥胜则干这一病理机制。