左金丸通过MALAT1调控miR-200s/JNK信号通路逆转大肠癌多药耐药的机制

The clinical use of chemotherapeutic drugs in colorectal cancer(CRC) treatment is limited by the occurrence of multidrug resistance(MDR). Our previous studies showed that miR-200s regulated the MDR of CRC through JNK signaling pathway, and Zuo Jin Wan upregulated miR-200s expression levels to overcome MDR through yet characterized mechanism. We also found that long non-coding RNA-MALAT1 plays an important role in CRC MDR, while Zuo Jin Wan can inhbit the expression of MALAT1. In addition, bioinformatics analysis showed that there were multiple miR-200s binding targets on the MALAT1 sequence, we therefore hypothesize that MALAT1 competes with miR-200s for the activation of JNK signaling, resulting in MDR in CRC. We propose to use cell and animal experiments and clinical trials, to explore how MALAT1/miR-200s/JNK signaling axis regulates MDR, how Zuo Jin Wan impacts MALAT1 expression levels, as well as MDR via modulating MALAT1/miR-200s/JNK signaling. The results of our study will help elucidate mechanisms of MDR and identify new therapeutic targets to overcome MDR in CRC.

多药耐药是影响大肠癌患者化疗疗效的重要因素之一。前期研究发现miR-200s通过JNK信号通路调节大肠癌多药耐药,左金丸能上调miR-200s增加大肠癌对化疗药物的敏感性 ,但其机制尚不清楚。课题组研究发现长链非编码RNA-MALAT1在大肠癌多药耐药中发挥着重要调节作用,而左金丸可以抑制MALAT1的表达。此外,生物信息学分析表明MALAT1序列上有多个miR-200s结合靶点。因此我们推测MALAT1可能以竞争性内源RNA角色结合miR-200s,并激活JNK信号通路以及促进大肠癌多药耐药。本课题将从细胞和动物实验以及临床实验验证三个层面,研究MALAT1/miR-200s/JNK信号轴调控大肠癌多药耐药的分子机制,并深入探讨左金丸通过上述信号通路逆转多药耐药的作用机理。这对于揭示大肠癌多药耐药的机制,明确中药逆转大肠癌多药耐药的靶点有着重要的科学意义。

奥沙利铂（L-OHP）是治疗结直肠癌的常用化疗药物，但在治疗的后期其疗效往往严重受限。我们之前的研究表明，中药方剂左金丸（ZJW）可以提高L-OHP治疗结直肠癌的敏感性，但具体机制尚不清楚。同时，在之前的机制研究中，我们发现在结直肠癌中高表达的miR-200s与L-OHP敏感性相关，并且miR-200s可以调节MDR1/p-gp和下游c-jun N-末端激酶（JNK）信号通路。此外，我们的初步实验表明，lncRNA-MALAT1在通过与miR-200相互作用调节耐药性方面具有巨大潜力。因此，在本课题中，我们探讨左金丸是否可以通过调节MALAT1、miR-200和下游信号通路来逆转结直肠癌中的L-OHP抗性。研究结果表明，左金丸可以显著降低L-OHP处理的HCT116/L-OHP细胞的增殖并促进其凋亡。我们进一步证明，左金丸可以通过降低MALAT1、间接上调miR-200s、减轻JNK信号轴的激活以及下调MDR1/ABCB1和ABCG2等耐药蛋白的表达来逆转HCT116/L-OHP细胞的耐药性。左金丸联合L-OHP可抑制裸鼠皮下移植瘤的生长并诱导其凋亡。左金丸降低移植瘤中MALAT1的表达，上调mir-200s的表达。此外，左金丸还降低JNK信号通路的激活，同时降低MDR1/ABCB1、ABCG2的表达。总之，左金丸可以通过调节MALAT1/miR-200s/JNK信号通路，降低p-JNK和MDR1/ABCB1的表达，逆转结直肠癌中的L-OHP耐药性，为左金丸在缓解化疗耐药性方面的临床应用提供实验依据。