IL-6对慢性鼻-鼻窦炎GSK3β表达的影响及机制研究

The mechanism of chronic rhinosinusitis(CRS) is still unknown clearly,it involves complex inflammatory microenvironment.IL-6 is one of most important cytokines which participates the chronic inflammation, it Participates in and magnifies the inflammation of the neutrophils (NEU), PI3K/Akt is one of the main signaling pathways of IL-6. GSK3β is one of the downstream protein of PI3K/Akt, its activation can feedback to increase IL - 6. Our preliminary research found that the expression of human neutrophil elastic protease (HNE,the activation products of NEU), IL - 6, PI3K/Akt, as well as GSK3βin CRS mucosal epithelium, are higher than those in normal epithelium. Therefore we hypothesize that the pathway of IL - 6 - - PI3K/Akt - - GSK3β- - HNE plays a significant role in the inflammatory microenvironment of CRS, it influences the apoptosis, proliferation of rhinosinus epithelium cells and leads to a long-term inflammation of CRS.In this research, we will observe how IL - 6 activates PI3K/Akt, influences the expression of GSK3βand HNE in vivo and in vitro, and analysze the relationship between IL - 6 and GSK3β, as well as HNE.We want to reveal the possible mechanism of CRS, provides some therapeutic clues for CRS.

慢性鼻-鼻窦炎（CRS)发生机制不明，涉及复杂的炎症微环境。IL-6是慢性炎症的重要调控因子，参与并放大中性粒细胞（NEU)的炎症反应，PI3K/Akt是其主要信号通路之一。GSK3β是PI3K/Akt的下游蛋白，其活化可反馈性增加IL-6的产生。本课题发现，CRS粘膜上皮中NEU的活化产物人中性粒细胞弹力蛋白酶（HNE)、IL-6、PI3K/Akt以及GSK3β的表达均较正常组织表达增高。故提出假设， IL-6- - PI3K/Akt- - GSK3β- - HNE该通路在CRS的炎症微环境中发挥重要作用，影响鼻-鼻窦粘膜细胞的凋亡、增殖,导致CRS的长期慢性炎症。本课题拟通过体内外实验，观察CRS中IL-6激活PI3K/Akt，影响GSK3β和HNE的表达，分析IL-6与GSK3β的关系，以及与HNE的关系，旨在证实课题假设，揭示CRS的可能机制。

慢性鼻-鼻窦炎（CRS)发生机制不明，涉及复杂的炎症微环境。IL-6是重要炎性燕子，参与并放大中性粒细胞炎症反应，PI3K/Akt是其主要信号通路之一。GSK3β的活化可反馈性增加IL-6的产生。我们假设，IL-6--PI3K/Akt--GSK3β通路在CRS的炎症微环境中发挥重要作用，导致CRS的长期慢性炎症。此外，OSM是IL-6家族的重要成员，紧密连接（TJs)维持鼻黏膜的重要屏障功能，这二者对CRS的炎症形成有重要作用，CRS中OSM的升高可导致TJs破坏，从而引起鼻黏膜长期慢性不愈的炎症。 . 研究包括二部分：一体外实验，观察CRS中IL-6激活PI3K/Akt，影响GSK3β的表达，分析IL-6与GSK3β的关系。采用WB方法，检测CRSsNP、CRSwNP以及鼻中隔偏曲患者鼻黏膜中IL-6、PI3K/Akt和GSK3β蛋白表达；采用qPCR检测三组鼻黏膜中IL-6和IL-6R的表达。二细胞试验，流感A病毒制作人类鼻黏膜上皮炎症的细胞模型，研究OSM对鼻黏膜上皮中ZO-1、Claudin-1、Occludin等TJs的影响。. 第一部分，我们发现：IL-6、PI3K/Akt、GSK3β在CRS患者中蛋白表达水平均高于对照组，差异有统计学意义，CRSsNP和CRSwNP组间无统计学差异。IL-6R mRNA在CRSsNP、CRSwNP和对照组中表达有统计学差异，CRSsNP和CRSwNP组间无统计学差异。IL-6在CRS患者中以糖基化（55kd)和非糖基化(25kd)2种形式存在,CRSsNP组中以糖基化为主(糖基化与非糖基化的蛋白表达量比值约为2.4:1); 在CRSwNP组中以非糖基化(25kd) 为主,糖基化与非糖基化的蛋白表达量比值约为（0.4:1）。第二部分，我们发现：OSM表达增加可导致ZO-1、Claudin-1、Occludin的下调，鼻黏膜屏障功能减退，导致CRS炎症迁延不愈。. 结果：IL-6通过鼻黏膜PI3K/Akt信号通路，诱导GSK3β表达，加重CRS炎症；另外，以OSM为代表的IL-6因子，破坏鼻黏膜上皮的紧密连接，导致鼻黏膜屏障功能破坏，引起CRS反复不愈。