人源RhoBTB3中ATPase活性自我抑制的结构基础

RhoBTB3是Rho癌基因家族中一个独特的成员。绝大多数Rho癌基因家族的成员都是GTPase。然而，2009年发表在Cell上的研究报告指出人源RhoBTB3是ATPase并在高尔基体和内体间的物质转运过程中起到了重要的作用。RhoBTB3的ATPase活性受到其自身的抑制。全长蛋白的ATPase活性仅仅是其Rho结构域的ATPase活性的一半。本研究项目旨在确定单独纯化的Rho结构域的晶体结构和RhoBTB3全长蛋白的晶体结构。本项目将通过对比这两个结构来揭示Rho结构域的结构变化从而阐明RhoBTB3对其ATPase活性进行自我抑制的机理。同时本项目将通过研究Rho结构域和AMPPNP的结合方式来确定RhoBTB3选择性结合ATP而不是GTP的原因。此外，本项目还将通过分析活性位点的结构来确定有催化作用的氨基酸残基或水分子的位置并在此基础上推测可能的催化机理。

获得了人源RhoBTB3中Rho结构域的晶体，但是晶体没有衍射能力。在本项目的资助下确定了拟糖基转移酶ValL的三维结构以及其和产物复合物海藻糖的三维结构。 通过基因敲除和回补的方法确定了ValL在井冈霉素生物合成途径中的作用。 确定了黑莫他丁合成途径上三个细胞色素P450酶（HmtT、HmtN、HmtS）的三维结构。通过比较他们的结构预测了他们识别不同底物的原因。 同时，确定了迭代聚酮还原酶SiaM的三维结构，阐明了其四聚体界面上的芳香堆积作用对于维持其结构和功能有重要作用。