SAT05f诱导小鼠斑片状毛发脱落及其固有免疫反应机理

斑片状毛发脱落也称斑秃（AA）是一种突发的局域性毛发脱失疾病。AA的病因至今未明。申请者在前期工作中发现，一种根据人微卫星DNA序列设计的单链脱氧寡核苷酸（SAT05f）可以在C57BL/6XBALB/C杂交F1代小鼠诱导局域性毛发脱落，其特征类似于AA。SAT05f不含鸟嘌呤，已被证明是固有免疫应答调节剂。新近的研究提示，表达NK细胞激活受体（NKG2D）的NKG2D+细胞介导的针对表达NKG2D配体（NKG2D-L）的毛囊细胞的固有免疫应答可能触发AA；NKG2D+细胞也能通过杀伤细胞免疫球蛋白样受体 (KIRs) 识别脱氧寡核苷酸而被进一步激活。根据上述，计划开展SAT05f诱导的小鼠斑片状毛发脱落及其固有免疫反应机理的研究。研究将围绕SAT05f 对 NKG2D＋细胞和NKG2D-L表达的调节展开。其结果可为阐明 NKG2D+细胞在AA发生中的固有免疫机理提供实验依据。

项目的背景：. SAT05f是一种根据人微卫星DNA序列设计合成的单链脱氧寡核苷酸（ODN），由CCT重复序列组成，也被称为CCT ODN，为一种调节性寡核苷酸（rODN）。在研究SAT05f 是否对系统性红斑狼疮（SLE）有治疗作用的过程中，意外的发现SAT05f能诱导雄性小鼠嘴部发生斑片状毛发脱落。以此为线索，围绕SAT05f诱导小鼠斑片状毛发脱落的现象及其固有免疫反应，特别是NKG2D+ 细胞介导的固有免疫机理展开了研究。.主要研究内容及重要结果：. 1、SAT05f 可使慢性移植物抗宿主疾病诱导的实验性狼疮肾炎雄性F1代小鼠、雄性Balb/c小鼠发生嘴周局部斑片状毛发脱落，在雌性的F1代小鼠、雌性Balb/c小鼠和雌雄性C57BL/6小鼠无此作用。. 2、SAT05f 可引起毛囊减少、水肿h和炎性细胞浸润，其病理学改变与人类的斑秃类似。. 3、SAT05f 诱导的斑片状毛发脱落与雄激素水平的高低无明显关系。 . 4、SAT05f 诱导的斑片状毛发脱落与雄激素受体的基因的变化无无明显关系。. 5、SAT05f 可迟滞人为脱毛小鼠的毛发再生。 . 6、单次注射SAT05f可使小鼠脾NKG2D+细胞数减少。多次注射SAT05f可使小鼠毛囊NKG2D+细胞显著增多、脾脏和外周血NKG2D+细胞倾向减少。这提示SAT05f可能动员其它部位的NKG2D+ 细胞进入毛囊而作用于毛囊细胞引起斑片状毛发脱落。. 7、SAT05f 能通过诱导IFN-γ使小鼠毛囊发生退行性变。. 8、SAT05f诱导的斑片状毛发脱落与小鼠血清中抗dsDNA抗体水平的升高无明显联系。. 9、寡核苷酸（ODN）可通过诱导免疫细胞产生细胞因子而刺激细胞表达NKG2DLs 使其成为NKG2D+细胞的靶细胞而被杀伤。 . 10、高水平表达NKG2DLs的细胞如毛囊细胞也可能被包括NK细胞在内的NKG2D+细胞杀伤。. 11、多次注射ODN可能在体内诱导毛囊细胞表达NKG2DL，使其成为包括NK细胞在内的NKG2D+细胞的靶细胞。.项目科学意义：. 本课题的结果提示，在将寡核苷酸研制成具有免疫调节活性的药物的过程中，应关注其可能出现的副作用，比如脱发，并根据其发生的机理寻找出应对的方法或药物，如抑制NKG2D+细胞的活性。.