分枝杆菌热休克蛋白对胶质瘤细胞裂解物的佐剂作用及其对Th17细胞的调节

Glioma is the most common brain tumor. The averge survival time for the glioma pateins received surgery, radiotherapy and chemotherapy is only within 8-11 months.Developing therapeutic vaccines for the treatment of glioma is obviously required.Having whole tumor antigens, potentially, glioma cell lystae(TCL) could induce anti-glioma immune responses against multiple targets. However, when applied alone, the TCL fails to induce glioma-rejecting immune responses. Therefore, it is nessessary to include powerful adjuvants into the TCL. Due to its property on assisting tumor antigens to be cross-presented to generate specific cytotoxic T lymphocytes and activating innate immune responses, HSP could be used as an adjuvant for tumor vaccines. In the proposed project, we plan to use mycobacterial HSP65 (mHSP65)as an adjuvant for the TCL to prepare a glioma vaccine (mHSP65-TCL), test the efficacy of the vaccine on inducing anti-glioma immune responses in mice and probe its underling mechanisms. The mechanism study is focused on how mHSP65-TCL induce and acitivate Th17 cells and how the induction and activation are correlated wirh the anti-glioma immune responses induced by mHSP65-TCL.

胶质瘤是最常见的颅内肿瘤，经手术、放疗和化疗治疗后，患者的平均生存期也仅为8～11个月。研制对胶质瘤有治疗作用的疫苗系重大需求。因含全套的肿瘤抗原，胶质瘤细胞裂解物（TCL）具有激发多靶点抗胶质瘤免疫应答的潜能。然而，单独用TCL不能诱导机体产生排斥胶质瘤的免疫反应，因此有必要在TCL中加入强效的佐剂。因可引导肿瘤抗原交叉提呈进而激活特异性细胞毒性T淋巴细胞并具有固有免疫刺激活性，热休克蛋白（HSP）可能成为肿瘤疫苗的佐剂。我们计划将重组分枝杆菌HSP65（mHSP65）用作胶质瘤细胞裂解物的佐剂并与其制成疫苗（mHSP65-TCL），在小鼠研究该疫苗的抗胶质瘤作用及其机理。机理研究围绕mHSP65-TCL对Th17细胞的调节展开，主要研究mHSP65-TCL在荷胶质瘤小鼠对Th17细胞的诱导激活作用及其与抗胶质瘤活性的关系。

胶质瘤是最常见的颅内肿瘤，经手术、放疗和化疗治疗后，患者的平均生存期也仅为8～11个月。研制对胶质瘤有治疗作用的疫苗系重大需求。因含全套的肿瘤抗原，胶质瘤细胞裂解物（TCL）具有激发多靶点抗胶质瘤免疫应答的潜能。然而，单独用TCL不能诱导机体产生排斥胶质瘤的免疫反应，因此有必要在TCL中加入强效的佐剂。因可引导肿瘤抗原交叉提呈进而激活特异性细胞毒性T淋巴细胞并具有固有免疫刺激活性，热休克蛋白（HSP）可能成为肿瘤疫苗的佐剂。我们计划将重组分枝杆菌HSP65（mHSP65）用作胶质瘤细胞裂解物的佐剂并与其制成疫苗（mHSP65-TCL），在小鼠研究该疫苗的抗胶质瘤作用及其机理。机理研究围绕mHSP65-TCL对Th17细胞的调节展开，主要研究mHSP65-TCL在荷胶质瘤小鼠对Th17细胞的诱导激活作用及其与抗胶质瘤活性的关系。取得的主要结果如下：. 1、在大肠杆菌表达了重组mHSP65，纯化了重组mHSP65，其纯度大于95%，符合人用标准；2、采用体内形成的小鼠胶质瘤制备了含全胶质瘤细胞肿瘤抗原的胶质瘤细胞裂解物，建立了质控标准；3、制备了mHSP65-TCL疫苗，建立了质控标准；4、建立了可重复的颅内或颅外种植胶质瘤细胞小鼠模型；5、证明采用治疗或预防方式应用mHSP65-TCL可延长荷颅内胶质瘤小鼠的生存期；6、证明mHSP65-TCL能在荷胶质瘤模型小鼠刺激IL-17的产生，诱导TH17细胞；7、证明mHSP65-TCL能刺激维甲酸受体相关孤儿受体的表达；8、证明mHSP65-TCL能增加肿瘤组织的Th17细胞和细胞毒性T淋巴细胞的数量；9、进一步证明mHSP65-TCL也能在小鼠发挥抗胰腺癌的作用；10、发现胶质瘤细胞的NKG2DL的表达水平和其成瘤活性有关；11、证明化疗药物如环磷酰胺并不影响mHSP65-TCL的效力，还可增强其效力。 . 该课题的完成为研制分枝杆菌热休克65-胶质瘤细胞裂解物疫苗并将其应用于人体提供了重要的实验基础。