紫杉醇嵌段聚合物纳米药物主动靶向治疗耐药乳腺癌的作用机理研究

乳腺癌细胞产生多药耐药是乳腺癌化疗失败最主要的原因之一，所以深入研究拮抗或逆转乳腺癌多药耐药有重要的理论和临床意义。紫杉醇是目前治疗乳腺癌最好的药物之一，临床广泛使用的制剂是采用聚氧乙烯蓖麻油增溶，国内主要依赖进口，其水溶液不稳定，毒副反应严重，并可诱发多药耐药。因此紫杉醇的新制剂研究是当前国际国内的热点，也有替代制剂上市，但仍存在增溶作用不稳定、安全性不够好，制备复杂，无主动靶向性，无法有效逆转多药耐药等问题。本项目拟针对上述关键问题，依据纳米胶束自组装原理，利用具有逆转肿瘤多药耐药功能的嵌段聚合物与可降低肿瘤耐药性的survivin 反义基因及两种新的乳腺癌单克隆抗体（抗BRCAA1和抗HAI-178）相偶联，构建对乳腺癌具主动靶向性并有效逆转乳腺癌耐药的紫杉醇纳米药物。本项目通过深入研究治疗耐药乳腺癌的新机理及新的调控途径，为提高紫杉醇的临床应用价值，实现靶向治疗耐药乳腺癌奠定基础。

采用加成、水解两步法合成了羧基功能化的P123型Pluronic嵌段聚合物，制备载有紫杉醇的纳米药物，该纳米药物具有良好的肿瘤靶向性；利用得到的嵌段聚合物衍生物，制备了载有雷公藤红素的纳米药物，建立了雷公藤红素的RP-HPLC含量测定方法，通过星点设计-效应面优化法对该纳米药物的制备进行了优化并对其进行了系统表征，该纳米药物具有一定缓释作用；利用核糖核酸酶A辅助合成了CdTe量子点，将其与Her2抗体偶联，制备了可主动靶向肿瘤细胞的多功能纳米探针，该多功能纳米探针可特异性靶向肿瘤细胞，核糖核酸酶A进入肿瘤细胞后参与降解RNA，引起肿瘤细胞出现显著凋亡特征；利用DiR染料标记小鼠胚胎干细胞，用以识别肿瘤细胞，发现DiR标记的小鼠胚胎干细胞可在静脉注射后10min内特异性靶向到肿瘤组织；采用星点设计-效应面优化法制备了一种可生物降解的聚(L-乙交酯-己内酯-丙交酯)聚合物纳米粒，该纳米粒具有良好的药物缓释能力，药物缓释时间可长达2个月以上；合成了一种含有量子点和超顺磁性纳米粒子的多功能纳米探针，该探针可用于标记间充质干细胞，可快速特异性识别肿瘤细胞，并在14天内于靶部位稳定表达荧光信号和磁信号，对于肿瘤的磁热疗可抑制肿瘤细胞的生长；利用核糖核酸酶辅助合成了生物毒性较小的Ag2S近红外量子点，该量子点不含有重金属，生物相容性好，发射波长达到980nm，可用于近红外成像；利用BRCAA1单抗偶联聚合物修饰的量子点，发现该荧光探针可在静脉注射10h后于小鼠荷瘤部位出现稳定荧光信号，表明该探针可特异性分布于肿瘤组织，用于肿瘤特异性靶向成像；采用两步法合成制备了HAI-178单抗偶联的荧光磁性纳米探针，该纳米探针既可用于荧光成像又可用于MRI成像，利用磁热疗可大大减缓肿瘤细胞的生长，对肿瘤起到治疗作用。