MiR-148a在结直肠癌中的调控网络及生物学功能研究

结直肠癌是常见的恶性肿瘤，严重威胁着人类的生命健康，研究结直肠癌的发生发展机制具有重要意义。近年成为研究热点的microRNA被证明成为一种新的调节基因表达方式，通过转录后抑制靶基因表达，在肿瘤中既可抑制抑癌基因发挥促癌作用，又可抑制癌基因发挥抑癌作用，这些microRNA与蛋白编码基因相互作用在肿瘤中构成精密的调控网络。申请者实验室初步研究结果与文献报道表明miR-148a可能是一个发挥抑癌作用的microRNA，因此研究miR-148a在结直肠癌中的调控网络机制及生物学功能对揭示结直肠癌发病机制，以及将来以microRNA为靶点对结直肠癌的预防和治疗干预具有重要意义。本研究拟采用交联免疫沉淀（CLIP）技术解析miR-148a直接作用的靶基因，利用生物信息学与分子生物学手段研究其上游转录因子调控方式；构建miR-148a在结直肠癌中的调控网络，明确其在结直肠癌细胞中的生物学功能。

结直肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，而且在我国的发病率总体上呈上升趋势，并且随着人们饮食结构和生活方式的改变，结直肠癌的发病率还会继续上升。积极开展结直肠癌发病机制研究，寻找新的分子标志物和治疗靶点不仅具有重要的临床价值而且具有重要的社会意义。近年成为研究热点的microRNA被证明成为一种新的调节基因表达方式，通过转录后抑制靶基因表达，在肿瘤中既可抑制抑癌基因发挥促癌作用，又可抑制癌基因发挥抑癌作用，这些microRNA与蛋白编码基因相互作用在肿瘤中构成精密的调控网络。本项目研究阐述了一条全新的凋亡信号通路，MYB能够识别并结合miR-148a基因组的转录因子结合位点，抑制miR-148a的转录和表达；miR-148a通过结合BCL-2的3’-UTR区转录后抑制BCL-2的表达，进而促进了细胞色素C的表达激活了Caspase3和Caspase9级联反应诱导凋亡。我们筛选并验证了miR-22是miR-148a的下游分子，在体外和体内实验结果表明miR-22通过转录后抑制BTG1抑制结直肠癌细胞自噬促进凋亡而增强结直肠癌细胞对5-FU的药物敏感性。该项目研究的进一步研究阐明miR-148a和miR-22及其相互作用网络不仅对结直肠癌5-FU化疗监测具有指导意义，而且对将来寻找结直肠癌治疗靶点进行靶向治疗具有重要意义。