乙酰肝素酶对局灶性脑缺血后血管新生作用的研究

促进血管新生，改善脑血流是脑缺血治疗研究的重点之一。乙酰肝素酶（Hpa）能降解基底膜和细胞外基质，释放和活化血管生长因子，诱导血管新生。但Hpa能否促进脑缺血后的血管新生未见报道。本研究将（1）建立大鼠局灶性脑缺血模型，观察Hap以及血管生长因子VEGF、bFGF、Ang-1/Ang-2基因和蛋白表达的时空变化，新生和总体微血管密度。将构建后Hpa基因慢病毒载体立体定向注入缺血灶周边或腹腔注射Hpa抑制剂PI-88，采用实时荧光定量PCR、荧光原位杂交、Western blot、免疫组化和神经行为学的评价等方法对比研究脑缺血后Hpa表达上调或抑制时对血管新生、组织修复和神经功能康复的作用。（2）培养血管内皮细胞并建立缺氧模型，上调或抑制Hap表达，用MTT、流式细胞仪、实时荧光定量等方法分析内皮细胞增殖、迁移，以及血管生长因子的水平。（3）检测人脑标本梗死及周围区Hap核酸或蛋白的表达。