NO/cGMP/PKG信号通路在人眼睫状体房水生成和氯离子转运中的作用研究

到目前为止，有关人眼房水生成的信号通路尚不清楚。本课题将在已有的工作基础上，系统地研究人眼睫状体组织中NO/cGMP/PKG信号通路对房水生成和离子（主要是氯离子）主动转运的作用。本课题将研究NO/cGMP/PKG信号系统在人眼睫状体中的表达及其影响因素；研究该信号通路在离体人眼睫状体房水分泌过程中的作用，以及与肾上腺素能α、β受体激动剂作用的关系，进一步研究该信号通路对离体人眼睫状体短路电流和氯离子 跨睫状体上皮细胞转运的作用及意义。本课题的研究结果将阐明NO/cGMP/PKG信号通路在房水生成中的作用以及与其它信号系统的相互关系，不仅有助于解释临床常用的减少房水生成药物的作用机制，对于进一步研发特异性强、副作用小的降眼压药物也将具有重要意义。

本课题系统地研究了人眼睫状体组织中NO/cGMP/PKG 信号通路对房水生成和离子（主要是氯离子）主动转运的作用及其意义。主要研究结果包括：.1、证实正常人眼睫状突上皮细胞三种一氧化氮合酶及鸟苷酸环化酶均有表达，nNOS和GC在睫状体PE和NPE细胞中分布的模式提示一氧化氮/环鸟苷酸（NO/cGMP）信号通路可能参与这两种细胞之间的信号传递，因而可能参与了人眼房水生成过程。.2、cAMP能增加从睫状体基质到房水的阴离子转运，结果提示环腺苷酸参与了人眼睫状突上皮组织的离子转运以及房水生成过程。.3、人眼睫状体上皮细胞中，cAMP引起的基质到房水的Cl-转运，而HCO3-也参与了这一转运机制。.4、HCO3-参与人眼睫状体上皮跨细胞离子转运（房水生成）过程，是NO/cGMP/PKG信号通路的作用底物之一；.5、NO-cGMP信号系统能促进人眼房水的分泌，Cl-的转运是其中关键步骤；.6、缝隙连接蛋白在人眼睫状体上皮中分布的模式，提示其作为主要蛋白参与构成人眼睫状体PE与NPE细胞之间的缝隙连接参与了房水生成的过程。NO/cGMP对Cx43表达有一定的增强作用，提示NO /cGMP信号通路可能对细胞间缝隙连接具有调节作用，NO-cGMP信号通路可能通过调节connexin43的表达参与房水生成的调节过程。.7、cAMP上调人眼但下调牛眼睫状体上皮中Cx43的表达，提示1) 第二信使cAMP对睫状体上皮细胞间缝隙连接具有调节作用，因而可能参与了房水生成的调节过程；2) cAMP对睫状体上皮细胞间缝隙连接的作用在人与其它动物之间存在差异。.本课题的研究结果揭示了NO/cGMP/PKG 信号通路在房水生成中的作用，以及与其它信号系统（如缝隙连接蛋白）的相互关系，进一步丰富了房水分泌和调控机制的相关理论，有助于解释临床常用的减少房水生成药物的作用机制，对于进一步研发特异性强、副作用小的降眼压药物也将具有重要意义。