白血病抑制因子防治大鼠青光眼性视神经损伤的作用及其机制研究

青光眼性视神经损伤的防治是当前眼科研究的热点和难点。本课题拟采用前房内注射聚苯乙烯微球的方法建立正常基因型和gp130受体（白细胞介素-6家族因子共同受体）基因敲除的大鼠青光眼模型，研究白血病抑制因子（LIF）在青光眼大鼠视乳头的表达改变，进一步研究外源性LIF对大鼠青光眼性视网膜神经节细胞凋亡和视神经轴突减少的保护作用，以及眼部应用的安全性，探讨LIF视神经保护作用与gp130-信号转导子与转录活化子3（STAT3） 信号通路以及甘丙肽（galanin）的关系。本项目充分利用基因改造大鼠的优势，在新的青光眼大鼠模型上系统研究LIF的视神经保护作用，研究成果将有助揭示青光眼的发病机制，并可望为青光眼性视神经保护提供新的思路和方法，为临床应用LIF进行青光眼性视神经损伤的防治提供充分理论和实验依据。

青光眼是全球第一位的致盲眼病，青光眼性视神经损伤的防治是当前眼科研究的热点。本课题采用前房内移植体外培养的结膜囊成纤维细胞的方法建立慢性大鼠青光眼模型，研究了白血病抑制因子（LIF）在急性和慢性青光眼大鼠视网膜的表达改变；进一步研究了LIF对大鼠急性和慢性青光眼性视网膜神经节细胞凋亡的保护作用及其机制。此外，本课题对姜黄素和神经生长因子防治青光眼性视神经神经损伤进行了初步研究。.重要结果如下：.1、首次以前房内移植体外培养的结膜囊成纤维细胞的方法，成功建立慢性青光眼动物模型。该动物模型持续性眼压升高至少3个月，出现特征性的视网膜神经节细胞损伤和视神经改变；.2、LIF及其下游信号系统在大鼠急性高眼压后的视网膜表达增强，提示LIF可能参与了视神经损伤/修复过程，其可能作用是通过激活JAK-STAT3和Akt信号通路实现的。.3、玻璃体腔注射LIF能减轻急性高眼压大鼠视网膜水肿，增加视网膜神经节细胞的存活。与此同时，大鼠视网膜自噬相关蛋白Beclin-1表达明显增强。应用自噬抑制剂氯喹和3-MA能显著抑制LIF的作用。结果提示LIF具有防治急性青光眼大鼠视网膜损伤的作用，其防治作用可能与其增强大鼠视网膜细胞的自噬活性有关。.4、璃体腔注射LIF能减少慢性青光眼大鼠视网膜神经节细胞的减少，大鼠视网膜组织凋亡相关蛋白caspase-3，Bax的表达下降，凋亡抑制蛋白Bcl-2表达增强。自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-II/LC3-I表达明显增强。结果提示LIF具有防治慢性高眼压大鼠视网膜损伤的作用，其防治作用可能与其增强视网膜细胞自噬活性有关。.5、姜黄素腹腔注射能有效减少急性高眼压大鼠的视网膜神经节细胞丢失，同时抑制凋亡促进因子caspase 3, cyto c和BAX 的活性，上调凋亡抑制因子BCL2的表达，上调自噬相关蛋白beclin-1, p62和LC3-II表达。结果提示姜黄素具有视神经保护作用，其作用机制与抑制凋亡和上调自噬活性有关。.6、神经生长因子凝胶应用于急性青光眼病人时，能减少视野缺损的增加，提示其具有防治青光眼性视神经损伤的作用。.本项目的研究结果均未见国内外相同报道，证实了LIF、姜黄素和神经生长因子的视神经保护作用，并初步探讨了作用机制。本项目的研究结果为青光眼性视神经损伤的防治提供的理论和实验基础。