中国青藏高原地区野生蜜蜂形态学、系统发生学和资源学研究

It is still a blank that research on feral honeybee's morphology, phylogeny, and resources in Qingzang Plateau for its extreme environments.We will survey habitats, living conditions and diversity of resources of feral honeybees in Qingzhan Plateau in detail basis on last project.All kinds of feral honeybee samples from about 100 sites varied in different climatic zones and geographic zones will be collected, and then, morphologic characters, mtDNA CoII gene, ND2 gene and CoI-CoII sequence RFLP variations will be analysised systematically. We expect to form a morphological and genetic report to support local feral honeybee resources, origin, phylogeny, which indicate the ecological effect of feral honeybee there, specially, to rise the scientific evidence to biodiversity in the ecological system. This investigation have huge significance to protect, explore and use sustainably this precious bioresources- - - - -feral honeybee in Qingzhan Plateau.

由于中国青藏高原特殊的环境条件的限制，对该地区野生蜜蜂的形态学、系统发生学和资源学研究至今仍是一个空白。本研究本项目在前一个已结题项目的基础上拟对青藏高原地区的野生蜜蜂的生境进行详细的调查，对其生存状况和资源多样性进行研究，在具有野生东方蜜蜂分布的地区根据不同的气候类型和地理环境选出约100个样点，采集各种野生蜜蜂标本,就这些蜜蜂的形态区系分类、mtDNA CoII 基因、ND2基因和CoI-CoII的序列变异DNA限制片段长度多态性等进行一次系统的研究，以期为该地区的野生蜜蜂的资源状况、起源、分化、系统发育的探讨提供一份基于形态和遗传物质的研究结果，为野生蜜蜂在当地生态系统中的作用，特别是在生态系统中维持生物多样性的作用等这些问题的探讨提供重要的科学依据。该项目研究为保护、持续开发和利用我国青藏高原地区这一宝贵的生物资源具有重要意义。

喜马拉雅山脉隆起，造成特异的高原环境，使在该山脉周围生存的动植物形成了独特的生物区系。然而，对于该区域的东方蜜蜂的多样性研究较少。本研究以喜马拉雅山南北两侧六个高原地区（尼泊尔，西藏，云南，四川，青海，甘肃）的东方蜜蜂为实验材料，共采集58群蜜蜂样本，通过形态学及分子生物学实验来探讨分析喜马拉雅山脉南北两侧东方蜜蜂的多样性及其分化程度。得出如下结果：1.形态学分类结果, 区辨分析与聚类分析结果相互对应，区辨分析中大致有三个较明显的聚类，其中云南部分地区与尼泊尔地区的东方蜜蜂聚为一类；甘肃与青海聚为一类；西藏、四川与云南部分样本聚为一类。2. 分子单倍型的分析，.从58群东方蜜蜂样本序列分析中发现了21种单倍型，将这21种单倍型与NCBI中公布的印度和日本共6种单倍型共同构建系统发育树，其结果中较为明显的是喜马拉雅山南坡（尼泊尔）与云南的东方蜜蜂聚为一类，而其他地区喜马拉雅山北坡的西藏与青海、甘肃和四川的东方蜜蜂没有明显聚类。并且结果显示作为外群的印度群蜜蜂并不与其他群东方蜜蜂聚类。3.遗传距离，58群样本根据地区分组后得到的遗传距离来构建UPGMA树中看出，云南与尼泊尔地区蜜蜂样本构成一个小的枝系，该枝系又与西藏构成一个大的枝系，而另一个枝系是由青海、甘肃、西藏与四川各个小的枝系构成。结论：其中COI—COII非编码区段分析结果与形态学结果较为一致。本文结果表明：喜马拉雅山南坡(尼泊尔)与云南的东方蜜蜂亲缘关系较近，而喜马拉雅山北坡的西藏与青海、甘肃和四川的东方蜜蜂亲缘关系较近。由此，推测尼泊尔与西藏及偏北地区由于喜马拉雅山隆起发生阻隔，形成了COI—COII非编码区段的遗传分化。