肝癌中IL-23调控巨噬细胞VEGF表达及血管生成能力的研究

以血管内皮生长因子（VEGF）为调控核心的肿瘤血管生成与肝癌病程进展密切相关。肿瘤微环境中巨噬细胞是VEGF的重要来源。我们的前期工作发现IL-23能够诱导巨噬细胞VEGF表达。本课题拟在前期试验基础上，研究IL-23对巨噬细胞中VEGF表达及血管生成能力的影响；在此基础上，锁定IL-23下游信号途径STAT-3和NF-κB及VEGF重要调控因子HIF-1，探索IL-23调控巨噬细胞血管生成能力的分子机制；在小鼠肝癌模型中验证IL-23的促肿瘤血管生成作用，探讨其中和性抗体在肝癌临床抗血管治疗中的潜在价值。本课题将对IL-23在肝癌血管生成中的直接作用进行研究，为慢性炎症与肝癌发生之间的联系提供新的研究思路，并为肝癌的临床抗血管生成治疗提供有意义的潜在靶点。

本课题拟研究IL-23对肝癌相关巨噬细胞中VEGF表达及血管生成能力的影响；在此基础上，探索IL-23调控巨噬细胞血管生成能力的分子机制及与肝癌发生发展的关系。在小鼠肝癌模型中验证IL-23 的促肿瘤血管生成作用。. 课题研究结果发现，与肝血管瘤组相比，不管在mRNA水平还是在蛋白水平，肝癌组的IL-23均明显高表达。相关性分析发现，IL-23的表达与VEGF呈正相关。除IL-23外，IL-17等炎性细胞因子的表达也有显著上调。. 在白细胞介素-23（IL-23）在肝癌血管生成中的作用及其可能的调控机制研究中。采用免疫荧光实验检测肝癌组织中VEGF的表达情况；通过体外管道形成实验观察IL-23对巨噬细胞系THP-1细胞促血管形成能力的影响；通过定量PCR方法和酶联免疫吸附（ELISA）方法分别检测外源性IL-23 对VEGFmRNA和蛋白表达的影响以及STAT3抑制剂和NF-kB抑制剂在其中的作用。研究结果显示，肝癌组织中，肿瘤相关巨噬细胞周围存在大量VEGF的表达；IL-23促进巨噬细胞诱导HUVEC管道形成的能力；外源IL-23可以剂量依赖性的上调THP-1细胞中VEGF mRNA水平和蛋白水平的表达；而STAT3抑制剂和NF-kB抑制剂，能显著抑制VEGF的表达。. 此外，我们进一步探索了IL-23和及相关细胞因子IL-17的表达与肝癌进展和预后的关系。对50例由慢性HBV感染者进展为肝癌的患者和150例保持慢性HBV感染者的分析结果显示，外周血清中IL-23含量较高的慢性HBV感染者更容易进展为肝癌。105例慢性乙肝病毒感染的肝癌患者外周血清中Th1-, Th2-, Th17-, Treg-相关细胞因子的表达。研究结果显示，IL-17含量较高的肝癌患者更容易发生术后转移。血清中IL-17浓度0.9pg/ml是肝癌早期复发的危险因素。体外共培养实验结果显示，IL-17可以促进肝癌细胞系QGY-7703的增殖，IL-17或者TNF-a中和抗体可以抑制IL-17对肝癌细胞增殖的促进作用。.