部分天然Nrf2/ARE通路激活剂对紫外线损伤的防护及机制研究

中波紫外线（UVB）照射产生氧自由基（ROS）而致细胞损伤和凋亡，研究报道少数化学合成物促使Nrf2/ARE通路活化清除ROS起保护作用，尚未见天然植物或中草药（TCM）干预UVB损伤对此通路的影响研究。本课题首先建成UVB损伤细胞模型，采用激光共聚焦显微镜技术初步筛选能够诱导Nrf2/ARE通路活化的部分TCM；cyclic voltammetry等电化学方法检测TCM干预UVB照射前后细胞ROS水平；流式细胞术检测各组凋亡细胞水平；彗星实验、免疫荧光、western blotting及RT-PCR等方法检测TCM干预UVB照射前后细胞DNA损伤及凋亡基因（p53等）表达、Nrf2/ARE基因及蛋白在细胞内的定位以及表达、此通路靶基因HO-1等基因及蛋白表达。综合上述指标，最终阐明部分天然TCM的主要作用靶点及多水平的分子调控机制，为更好的防护紫外线损伤乃至皮肤癌提供新思路。

本课题按计划完成。研究首先建成UVB损伤细胞模型，采用细胞化学及激光共聚焦显微镜技术初步筛选能够诱导Nrf2/ARE通路活化的部分天然中草药如红景天苷、原花青素等；采用流式细胞术检测红景天苷等干预UVB照射前后细胞ROS水平；免疫荧光、western blotting及RT-PCR等方法检测TCM干预UVB照射前后细胞DNA损伤、Nrf2/ARE基因及蛋白在细胞内的定位以及表达、此通路靶基因HO-1、NQO-1基因及蛋白表达。综合上述研究，最终阐明了部分天然中草药如红景天苷等的主要作用靶点及多水平的分子调控机制，为更好的防护紫外线照射所致皮肤损伤及皮肤癌研究提供了新的思路。