以研究人参总皂甙调控红系细胞增殖分化和存活的EPOR机制探讨EPO对不同类型造血细胞的作用

现有研究发现：TSPG是一种适应源性药物，既能促进正常造血干／祖细胞向红系细胞增殖分化，又能抑制K562细胞增殖，诱导其凋亡或向红系细胞分化。探讨其机制发现TSPG以不同的EPOR机制影响正常血细胞（EPO依赖性）和异常血细胞K562（EPO非依赖性）的增殖分化或存活，反映出EPO对不同类型的造血细胞具有不同的作用。因此我们提出研究TSPG影响不同病理、生理情况下造血细胞对EPO反应性可作为一独特的模型系统，来探讨EPO的不同效应性是否由不同的EPOR机制所致，同时揭示TSPG影响这些细胞命运的机制。课题构想以不同EPO依赖性的白血病细胞株，以及正常人、各种贫血患者造血细胞为研究对象，建立贫血动物模型进行体内外实验，探讨TSPG影响红系细胞增殖分化与存活的不同EPOR信号机制和EPO的相应功能，为临床应用EPO和/或中药治疗不同类型血液病乃至某些非造血细胞肿瘤的策略提供实验依据和有益线索。

本项目研究TSPG对不同类型的白血病细胞株及红系细胞增殖分化与存活的不同EpoR信号机制和Epo的相应功能。已基本完成本课题的研究内容，目前已发表论著14篇（SCI论文6篇）。这些研究结果为临床应用Epo及中药治疗不同类型血液疾病的策略提供实验依据和有益线索。.研究工作的主要进展及阶段性成果：.一、人参总皂苷TSPG+/-EPO对白血病细胞KG1α增殖分化的影响及其机制的研究.① TSPG能抑制KG1-α 细胞增殖并诱导其向红系分化，添加Epo后能在较低浓度达到同样的效果，且能使细胞阻滞在G0/G1期。.② TSPG能下调KG1-α细胞内由EpoR介导的JAK-STAT通路相关蛋白的表达，并降低EpoR的活性，进而下调Bcl-2，上调Bax和Cleaved Caspases-3来促进细胞凋亡，而添加了Epo后这种作用则会被拮抗；抑制KG1α细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。.二、人参总皂苷（TSPG）对小鼠贫血模型造血功能的作用.① TSPG能缓解小鼠贫血症状；.② TSPG能上调EpoR的表达，促进红系分化达到促进造血的功能。.三、人参总皂苷主要单体成分对EPO非依赖性（K562）和依赖性 (TF1) 细胞株增殖的影响及诱导分化的作用.① 人参总皂苷单体Rg1在体外对K562和TF1/Epo细胞的增殖有明显抑制作用并能诱导其向红系、粒系细胞分化；.② Rg1使K562和TF1/Epo的EpoR表达降低，两种细胞胞膜EpoR蛋白表达随Rg1剂量的增加而显著下降。在EpoR蛋白质水平降低之前，Rg1已使得TF-1/Epo细胞EpoR介导信号通路转导的能力减弱，而在K562细胞此作用不明显；.③ Rg1可能是通过有效上调细胞内Bax和cleaved caspase3的表达，增加其促凋亡作用，降低Bcl-2的表达下调其抗凋亡活性来发挥诱导细胞凋亡的作用。