短双链RNA介导的RNA干扰对柯萨奇病毒细胞内清除作用研究

该研究利用RNA干扰技术（RNA interference）以柯萨奇病毒感染传代细胞和原代心肌培养细胞为研究对象较系统的观察短双链RNA介导的RNA干扰对病毒的免疫清除作用。根据CVB3基因组序列特点，合理设计SiRNA。观察SiRNA在细胞内对病毒毒力的抑制和在病毒感染量化的基础上，得到SiRNA对病毒的清除率和清除时间。对病毒蛋白表达和RNA产生抑制程度。对细胞克隆化以对残留病毒程度和再增殖的观察。探讨在细胞中SiRNA抑制病毒的作用途径，将验证和鉴别SiRNA的作用不同于长双链RNA激活的干扰素和酶的作用，而直接特异性的降解病毒靶基因的证据。研究SiRNA抑制靶mRNA序列特异性的、剂量与抗病毒效果之间关系、SiRNA在细胞内代谢曲线和毒性实验。本研究拟估价SiRNA的技术在治疗病毒性感染的可能性，并提供较完整的抗病毒数据和研究资料，为开辟治疗病毒感性疾病的新途径奠定基础。