成年男性精子活力不足分子标记物筛选及诊断应用基础研究

通过全基因组60mer寡核苷酸基因芯片检测系统分析成年男性精子活力不足和活力正常的精子基因表达谱，对它们进行两两比较，筛选出与成年男性精子活力不足密切相关的基因。同时，将上述两种基因表达谱分别与已有的体内26种其它正常组织的基因表达谱进行两两比较，从而更全面和深入地阐述精子发生、分化和成熟过程的调控机制和相关的调控基因。然后之用RT-PCR、Northern Blot等方法对芯片的结果进行验证，进一步明确与成年男性精子活力不足密切相关的基因类分子标记物,以及与精子发生、分化、成熟相关的调控基因。下一步结合生物信息学的原理和方法，分析这些基因的编码序列，在线预测表达蛋白的空间结构。之后分别采用western blot、免疫荧光染色法检测这些蛋白质在细胞中的表达情况及细胞定位，筛选出高表达的膜蛋白或者分泌性蛋白，为下一步制备这些蛋白的单克隆抗体，筛选出可用于临床检测的蛋白类分子标记物奠定基础。