鸡传染性支气管炎病毒影响宿主天然免疫TLRs和MDA5信号通路分子机制的研究

Avian infectious bronchitis (IB) is an acute, highly infectious and contagious respiratory disease worldwide, caused by avian infectious bronchitis virus (IBV) and resulting in severe economic losses. IBV molecular pathogenesis and immunity mechanism is the main direction of the research of IB prevention and control. There isn't currently research on the molecular mechanisms of avian infectious bronchitis virus effect on the signaling pathways of host innate immunity. The expression profiles of pattern recognition receptors, adaptors, kinase, transcription factors and cytokines in tracheal mucosa and kidney as well as pattern recognition receptors of innate immune cells will be analyzed by real-time fluorescence quantitative RT-PCR, Western blot,ELISA and Flow cytometry at molecular level at defined time points after infection of chicks in vivo with respiratory and nephropathogenic IBVs of different serotypes. The objectives of the present study are to reveal the effect of IBV infection on the TLRs and MDA5 signaling pathway of host innate immunity and uncover the molecular mechanisms of host antiviral innate immune response for IBV, providing scientific basis for the study of molecular pathogenesis and immunity mechanisms, immune control and antiviral drugs.

鸡传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病，给养禽业造成严重经济损失。IBV感染致病与免疫机制是IB防控研究主要方向，目前缺乏IBV感染对宿主天然免疫信号通路分子机制的研究。本项目从宿主天然免疫TLRs与MDA5信号通路的功能效应分子入手，用不同血清型的呼吸型、肾型IBV感染宿主，应用实时荧光定量RT-PCR、Western blot、ELISA和流式细胞术，对比研究不同血清型的呼吸型、肾型IBV感染对气管黏膜和肾脏的模式识别受体、接头蛋白、激酶复合体、转录因子、干扰素刺激基因和细胞因子及对先天免疫细胞的模式识别受体的影响和差异，从分子水平解析鸡IBV感染对宿主天然免疫TLRs与MDA5信号通路的影响作用，揭示鸡IBV对宿主抗病毒天然免疫反应调节作用的分子机制，为IBV分子致病与免疫机制、免疫防治以及抗病毒药物研究提供新的思路。

鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis, IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus, IBV）引起的鸡的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病，给养禽业造成比较严重的经济损失。IBV基因组容易发生变异，导致血清型复杂且不同血清型间免疫交叉保护效果差，故IB防控非常重要。IBV感染致病与免疫机制研究是IB防控的主要方向之一。天然免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。研究表明IBV感染早期能迅速激活天然免疫应答，但涉及IBV感染的天然免疫应答的研究非常有限。目前缺乏IBV感染影响天然免疫信号通路的系统研究，更没有不同致病型IBV感染影响天然免疫信号通路的比较研究。本项目从天然免疫TLRs与MDA5信号通路关键分子入手，用不同血清型的呼吸型和肾型IBV毒株感染宿主，应用实时荧光定量RT-PCR、Western blot、ELISA和流式细胞术，从分子水平对比研究不同致病型IBV毒株感染对气管黏膜和肾脏组织信号通路中的模式识别受体、接头蛋白、激酶复合体、转录因子、干扰素刺激基因以及外周血中先天免疫细胞模式识别受体表达的影响和差异，同时检测黏膜免疫SIgA和病毒载量的变化，旨在从分子水平解析鸡IBV感染对宿主天然免疫TLRs与MDA5信号通路的影响。结果发现不同IBV感染后TLRs和MDA5信号通路识别受体及关键分子、I型干扰素及细胞因子在不同组织的表达存在一定的差异性，肾脏组织MDA5信号通路、核转录因子IRF7及I型干扰素对不同IBV的应答存在明显差异，且与病毒载量存在一定相关性。本研究解析了不同IBV感染对宿主天然免疫TLRs与MDA5信号通路的影响作用，揭示鸡IBV对宿主抗病毒天然免疫反应调节作用的分子机制以及IBV调控天然免疫反应的多样性和复杂性，为IBV致病机理、免疫防治及抗病毒药物研究提供新的思路。本研究具有研究思路和理论上的创新。