Hippo/TAZ信号通路介导间质上皮转化在eMSC抑制子宫内膜纤维化中的作用机制研究

Endometrial fibrosis has been implicated in the development of intrauterine adhesion, which is characterized by epithelial mesenchymal transition (EMT). As a reverse process of EMT, mesenchymal epithelial transition (MET) involves in endometrial regeneration. So it is important to understand the process of MET for prevention of endometrial fibrosis. We found that the expressions of α-SMA and collagen I in endometrial stromal cells were down regulated by endometrial mesenchymal stem cells (eMSC), while the expression of cytokeratin was up-regulated. It suggested that eMSC could promote MET and prevent endometrial fibrosis. The Hippo/TAZ signal pathway plays an important role in regulating EMT process and the expression of α-SMA. Meanwhile, it shows a specific temporal and spatial expression in endometrium. These imply that Hippo/TAZ signal pathway is important for eMSC to inhibit endometrial fibrosis. In this study, we plan to clarify the mechanism of eMSC in preventing endometrial fibrosis in vivo and in vitro. Our research will provide a new strategy for the treatment of intrauterine adhesion.

子宫内膜纤维化是宫腔粘连最显著特征，主要病理生理过程为上皮间质转化，而间质上皮转化作为其逆反过程参与子宫内膜再生修复。因此明确子宫内膜间质上皮转化过程，对抑制子宫内膜纤维化促进修复至关重要。我们前期研究发现子宫内膜间充质干细胞(eMSC)可使子宫内膜间质细胞纤维化因子α-SMA、collagen I表达下调，上皮性标记cytokeratin表达上调，提示eMSC具有促进间质上皮转化、抑制子宫内膜纤维化作用，但其具体作用机制尚不清楚。Hippo/TAZ信号通路在调控上皮间质转化及α-SMA表达中有关键作用，而且在子宫内膜中呈特异性时空表达，提示Hippo/TAZ信号通路很可能是eMSC在抑制子宫内膜纤维化中的重要机制。本项目拟从体内和体外实验进行深入研究，阐明Hippo/TAZ信号通路介导的间质上皮转化在eMSC抑制子宫内膜纤维化中的作用机制，为宫腔粘连的治疗提供新的的理论基础和潜在靶点。

宫腔粘连患者的子宫内膜基底层被大量破坏，子宫内膜再生障碍，取而代之为大量的致密纤维组织，导致子宫壁粘连，引起月经量减少、闭经及不孕等临床症状。尽管随着宫腔内药物治疗支架及抗生素的应用，宫腔粘连治疗后复发的几率在逐渐减少，然而，对于中重度粘连，宫腔镜下粘连分解术后粘连再发率仍居高不下，也是宫腔粘连治疗的一大难题。干细胞再生医学已取得可观临床试验结果，也确实有研究应用骨髓干细胞治疗宫腔粘连后，使患者月经改善及获得妊娠。经血干细胞来源于脱落的子宫内膜组织，与骨髓间充质干细胞类似，具有多向分化潜能，已被证实可修复受损心肌细胞及减轻心肌梗死后心肌细胞的纤维化形成。然而，对于经血干细胞在宫腔粘连中的治疗作用及相关机制尚未被报道。本项目通过旨在明确经血干细胞是否能抑制宫腔粘连患者子宫内膜纤维化过程，而hippo/TAZ信号通路是否参与了这个过程。本项目中，共培养经血干细胞或经血干细胞条件培养基均显著下调αSMA与collagen I的mRNA及蛋白表达水平，促进子宫内膜间质细胞迁移，上调hippo信号通路中的phos-LATS1(1059), phos-MOB1及phos-TAZ的表达水平。经血干细胞条件培养基显著促进子宫内膜间质细胞增殖，同时使TAZ从子宫内膜间质细胞核内移出，滞留于胞浆。TGFβ显著上调子宫内膜间质细胞中纤维化相关因子αSMA、collagen I、CTGF及fibronectin的mRNA表达水平，抑制子宫内膜间质细胞的迁移，但对子宫内膜间质细胞的增殖力无影响。TGFβ可使phos-TAZ的蛋白表达水平下调，并使TAZ滞留于细胞核内。共培养经血干细胞或经血干细胞条件培养基可显著逆转TGFβ的作用，使TGFβ诱导的αSMA、collagen I、CTGF及fibronectin表达下调，恢复子宫内膜间质细胞的迁移力，促进创伤修复。研究结果表明经血干细胞可能是通过旁分泌途径抑制子宫内膜间质细胞向肌成纤维细胞转化，并促进间质细胞增殖及迁移，促进创伤愈合，Hippo/TAZ信号通路是被经血干细胞激活的信号通路之一。