microRNA-194在非酒精性脂肪性肝病发病机制中作用的研究

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) has become the most common form of chronic liver disease worldwide. Whereas, the exact pathogenesis of NAFLD remains obscure. Recent studies revealed that a new class of endogenous regulatory RNAs, microRNAs may play an important role in the regulation of liver energy metabolism. To explore the pathogensis of NAFLD, we are going to study the role of miR-194 on the glucose and fatty acid metabolism in normal or steatosis hepatic cells. And the effect of miR-194 dysregulation on the protein level of pyruvate dehydrogenase in hepatic cells will be evaluated. This study is trying to demonstrate the regulatory roles of miR-194 in the hepatic energy metabolism and the pathogensis of NAFLD, and to provide clues for new therapies of NAFLD.

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）已成为世界范围内最常见的慢性肝病，但NAFLD发病和逐渐进展的分子生物学机制尚不明了。已有研究表明新近发现的具有重要调节功能的内源性小分子RNA- - microRNA可能参与了肝脏能量代谢的调节。为进一步探索NAFLD的发病和进展的病理生理学机制，本研究拟采用反义寡核苷酸干扰和microRNA真核表达载体脂质体转染等手段，观察miR-194表达增强与表达抑制对体外正常肝细胞和脂肪变肝细胞糖、脂代谢，以及对丙酮酸脱氢酶E1β（PDHB）的蛋白表达水平的影响，并进一步抑制PDHB表达后观察miR-194作用的变化，以期探索miR-194在肝脏能量代谢和NAFLD发病机制中的调控作用及其相关靶基因和作用机制，为进一步开辟新的治疗措施提供理论线索。

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）已成为世界范围内最常见的慢性肝病，但NAFLD发病和逐渐进展的分子生物学机制尚不明了。已有研究表明新近发现的具有重要调节功能的内源性小分子RNA——microRNA可能参与了肝脏能量代谢的调节。为进一步探索NAFLD的发病和进展的病理生理学机制，本研究采用microRNA真核表达载体脂质体转染和反义寡核苷酸干扰手段，观察miR-194表达增强与表达抑制对体外正常肝细胞和脂肪变肝细胞糖、脂代谢，以及对丙酮酸脱氢酶E1β（PDHB）的蛋白表达水平的影响，并进一步抑制PDHB表达后观察miR-194作用的变化。结果表明，miR-194在非酒精性脂肪肝细胞模型中表达明显升高，而PDHB的表达水平在非酒精性脂肪肝细胞模型中明显下降；提高正常肝细胞内的miR-194水平可显著降低正常肝细胞的糖原合成能力，但对肝细胞内甘油三酯含量没有显著作用；而抑制非酒精性脂肪肝细胞模型中miR-194的表达水平后，肝细胞内甘油三酯含量显著降低，PDHB表达水平显著提高，但肝细胞的糖原合成水平没有明显变化。非酒精性脂肪肝细胞模型抑制miR-194的表达后，PDHB表达水平的变化对脂肪肝细胞的糖原合成和甘油三酯含量有一定影响，但差异并不显著。这些结果提示了miR-194可能参与了正常肝细胞糖原合成的调控和非酒精性脂肪变肝细胞甘油三酯合成的调控，其调控过程可能有PDHB的参与作用。这些结果揭示了miR-194在肝细胞糖、脂代谢调控中的作用及部分机制，为NAFLD可能的分子靶向治疗提供了重要的理论线索和基础，为NAFLD的治疗提供了一种全新的探索方向，具有重要的社会意义和科学价值，有利于推动相关卫生事业的发展，减轻因NAFLD的高患病率带来的社会经济负担。