辛伐他汀调节小G蛋白干预肺动脉高压的实验研究

肺动脉高压（PAH）是一类预后差处理棘手的疾病。近年治疗虽有所进展，但临床仅部分患者获益，且价格昂贵大部分患者无法承担，因此需要寻找效价比好的药物。动物及临床研究显示他汀能减轻或逆转PAH的形成，但机制不明确。小Ｇ蛋白是包括Rab、Ras和Rho等的小分子蛋白质，具有GTP酶活性，参与调控细胞生长、细胞膜运输等。目前研究显示RhoA/Rho激酶信号通路可促进平滑肌细胞增生，Rab可调节前向膜运输参与PAH发病。小G蛋白需要将其C末端异戊二烯化才具备GTP水解酶功能。 而他汀可抑制胆固醇的中间代谢产物异戊二烯产物，抑制小Ｇ蛋白异戊二烯化。据此我们设想他汀可能通过调节小G蛋白，促进内皮细胞凋亡干预PAH的形成。本研究拟通过野百合碱诱导的大鼠ＰＡＨ模型及体外培养的人肺动脉内皮细胞，了解辛伐他汀对PAH大鼠的干预作用，观察小G蛋白水平及内皮细胞增凋亡情况，了解辛伐他汀调控小G蛋白干预PAH的作用。

目的：.研究小G蛋白在肺动脉高压发病中的作用，并探讨他汀类药物对肺动脉高压的治疗机制。.方法：.动物实验： 60只体重250g-300g雄性SD大鼠随机分为正常对照组、野百合碱组、辛伐他汀组、野百合碱+辛伐他汀组。野百合碱组及野百合碱+辛伐他汀组给予野百合碱50mg/kg腹腔注射，其余两组给予等量生理盐水腹腔注射。注射同日起，野百合碱+辛伐他汀组及辛伐他汀组给予辛伐他汀2mg/kg灌胃，其余两组等量注射用水灌胃。正常饲养4周后，导管测定肺动脉压力，大鼠肺组织石蜡切片，HE染色及VG染色确定肺血管病变,免疫组化及Western blot测定Rab、Rac、RhoA、Rho激酶、Cav-1、caspse3及PCNA蛋白表达，PCR测定Rab、Rac、RhoA、Rho激酶、Cav-1、caspse3及PCNA的mRNA表达。.细胞实验：人肺动脉内皮细胞转代培养后，分为正常培养组、吡咯野百合碱组、辛伐他汀组、吡咯野百合碱+辛伐他汀组、吡咯野百合碱+辛伐他汀+甲羟戊酸组、吡咯野百合碱+辛伐他汀+FPP组、吡咯野百合碱+辛伐他汀+GGPP组培养72小时。电镜观察细胞结构，Western blot及PCR内容与动物实验相同。.结果：.本研究结果证实肺动脉高压大鼠模型中Rab、Rac、RhoA、Rho激酶、caspase3和PCNA蛋白及mRNA均明显升高。通过辛伐他汀干预后，大鼠肺动脉高压改善，同时伴有上述蛋白及mRNA下降。体外细胞培养证实辛伐他汀干预后，小G蛋白表达下降，人肺动脉内皮细胞增生及凋亡改善。.结论：.小G蛋白家族成员Rab、Rac、RhoA、Rho激酶均参与野百合碱诱导的肺动脉高压发病。辛伐他汀抑制小G蛋白表达而抑制人肺动脉内皮细胞增生及凋亡，并改善肺动脉高压的发生及进展。