基于RAGE-Aβ途径探讨解毒通络复方保护内皮细胞防治AD的分子机制研究

Early in the process of Alzheimer's disease (AD), when levels of pathogenic amyloid β (Aβ) peptide are low, mechanisms mediating of Aβ and cell surface binding sites-receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) could contribute importantly to neuronal dysfunction. Numerous studies have reported that RAGE from brain microvascular endothelial cells are involved in neuroinflammation in AD. Moreover, we also found that a modern Chinese formula based on Traditional Chinese Medicine theory named Jie Du Tong Luo (JDTL) can not only impact the paracrine function of brain microvascular endothelial cells, but also improve learning and memory, promote the degrading of Aβ and clear amyloid plaque from the AD rat brain. With brain microvascular endothelial cells as key target, the major goal of this project were to assess the expression of RAGE in the condition of different active principle of JDTL and its potential inflammatory role in the pathogenesis of AD.For one thing, it is meaningful for basal theory of Chinese Medicine collaterals. For another thing, it is a scientific explanation for therapeutic pathway of Traditional Chinese Medicine formula.

脑微血管内皮细胞功能失调，激活AD神经性炎症反应导致神经功能障碍。因此，保护内皮细胞为防治AD提供新视角。RAGE-Aβ途径是造成AD早期神经损伤的关键。内皮细胞通过RAGE-Aβ途径诱导炎症反应，成为AD早期神经功能障碍的重要原因。前期工作发现：解毒通络复方具有保护脑微血管内皮细胞的作用，以及改善AD模型大鼠的学习记忆功能。据此提出该复方通过干预RAGE-Aβ途径，从保护内皮细胞的角度防治AD的假说。本课题以离体培养脑微血管内皮细胞和APP/PS2转基因动物模型为研究对象，观察内皮细胞RAGE-Aβ途径的变化、相关炎症因子的表达及其下游信号通路的激活；采用RNAi技术沉默内皮细胞的RAGE，对比沉默前后相关炎症因子表达的变化，以及解毒通络复方对这种变化的影响特征。阐明该复方干预RAGE-Aβ途径保护内皮细胞的靶点，揭示RAGE-Aβ途径介导的炎症反应机制，为中药复方防治AD提供新思路。

脑微血管内皮细胞（BMEC）功能失调，激活AD神经性炎症反应导致神经功能障碍。因此，保护内皮细胞为防治AD提供新视角。RAGE—Aβ途径是造成AD早期神经损伤的关键。内皮细胞通过RAGE—Aβ途径诱导炎症反应，成为AD早期神经功能障碍的重要原因。前期工作发现：通络救脑（TLJN）具有保护脑微血管内皮细胞的作用，以及改善AD模型大鼠的学习记忆功能。据此提出该复方通过干预RAGE—Aβ途径，从保护内皮细胞的角度防治AD的假说。本课题首先是以BMEC为研究对象，以TLJN为干预药物，探讨BMEC的RAGE与Aβ结合后，是否可以激活相关细胞信号转导通路，影响内皮细胞炎症因子VCAM-1、MIP-1β、CCR5的表达，解析TLJN保护BMEC的分子机制；进而通过在体研究TLJN对快速老化模型小鼠（SAMP8）的干预作用。通过离体和在体研究相结合，阐明TLJN通过干预RAGE—Aβ途径，抑制炎症反应，从保护内皮细胞的角度控制AD发生和发展，同时，揭示RAGE—Aβ途径介导的炎症反应机制，为中药复方防治AD提供新思路。