H5N1血凝素蛋白对cAMP依赖的CFTR氯通道的影响及其介导急性肺损伤的机制

急性肺损伤是禽流感早期感染导致高死亡率的主要原因。囊性纤维化跨膜电导调节体（Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）是定位于呼吸道上皮细胞顶膜面的cAMP依赖的氯通道，该通道功能性的缺失会激活NFkB的信号通路，介导内源性的炎症反应，引起急性肺损伤。我们的前期研究发现，H5N1禽流感病毒的血凝素蛋白（Hemaglutinin，HA）能激活气道上皮中的JAK3进而抑制了cAMP依赖的CFTR氯通道。因此，本课题拟主要应用激光共聚焦显微镜技术、RT-PCR、western-blot、ELISA等技术方法研究H5N1禽流感病毒HA膜蛋白对呼吸道上皮细胞cAMP依赖的CFTR氯通道及JAK/STAT免疫炎症信号通路的影响，探索禽流感诱发的急性肺损伤的病理机制，为筛选靶向抗炎药物奠定基础。

临床及实验研究证实，与SARS一样，急性肺损伤是高致病性禽流感H5N1病毒早期感染导致高死亡率的主要原因。囊性纤维化跨膜电导调节体（Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）是定位于呼吸道上皮细胞顶膜面的环磷酸腺苷(cAMP)依赖的氯通道，该通道功能性的缺失会激活核转录因子（NF-kB）的信号通路，介导内源性的炎症反应，引起急性肺损伤。本研究应用基因敲除小鼠和短路电流技术、免疫荧光技术、液相芯片等技术方法研究H5N1禽流感病毒HA膜蛋白对呼吸道上皮细胞cAMP依赖的CFTR氯通道及相关免疫炎症信号通路的影响，初步证实了H5N1禽流感病毒表面膜蛋白(Hemaglutinin，HA)通过抑制呼吸道上皮细胞cAMP依赖的CFTR氯离子通道，激活了介导急性免疫炎症反应的JAK/STAT和NF-kB信号转导通路，阐明病毒作用呼吸道上皮细胞启动的早期免疫反应信号链；选择性抑制JAK3能激活被HA抑制的cAMP依赖的CFTR氯离子通道，显著减轻H5N1病毒HA蛋白诱导的急性肺损伤，为筛选靶向抗炎药物提供了理论依据。