广西壮药狗肝菜多糖对涎腺放射性损伤的防护作用及机制研究

Xerostomia caused by irradiated damage of salivary glands is still a difficult problem. In recent years, the modern pharmacological study for Zhuang medicine Dicliptera chinensis is being focused on. Our previous study shows Dicliptera chinensis polysaccharide can enhance proliferation activity and inhibit death for irradiated salivary gland cells, which preliminarily confirm it has potential protection from irradiation. Based on above study, we are going to research effects of Dicliptera chinensis polysaccharide on growth activity, cytomorphology, secretory function, cell apoptosis, microvascular density, and the levels of ROS, VEGF, AQP5 and P53 in irradiated salivary glands in vitro and in vivo. Through the research, we will probe into active mechanism of Dicliptera chinensis polysaccharide to protect salivary glands from radiated injury, and hope to lay the foundation for its exploration and clinical application.. Guangxi is a high incidence area of nasopharyngeal carcinoma and oral cancer. So xerostomia patients caused by radiation are increasing every year. Dicliptera chinensis is one of common Zhuang medicinal materials which has rich source and grows easily in Guangxi. No doubt, exploiting and applying national Zhuang medicine for preventive treatment will have a bright prospects and immeasurable clinical value.

头颈肿瘤放疗导致涎腺损伤，引起口干等并发症，依然是临床棘手的问题。近年来，壮药狗肝菜的现代药理学研究引起了人们的关注。我们前期实验初步表明：狗肝菜多糖可增强放射后涎腺上皮细胞的增殖活性、减少细胞死亡，具有潜在的防辐射作用。在此基础上，通过体内、外实验，观察狗肝菜多糖对放射后涎腺细胞的生长活性、细胞形态学、分泌功能、细胞凋亡、涎腺内微血管密度及ROS、VEGF、AQP5、P53表达水平的影响，还检测狗肝菜多糖对放射性涎腺细胞DNA双链断裂修复信号通路Mre11/Rad50/Nbs1的干预作用。通过上述研究，探讨狗肝菜多糖对涎腺放射性损伤的防护机制，为其开发及临床应用提供依据。. 广西为鼻咽癌、口腔癌高发区，因头颈放疗引起的口干症逐年增多。狗肝菜是壮药常用药材，在广西地区来源丰富，易于培植生长。充分挖掘和利用具有民族特色的壮药治疗广西常见病，无疑具有广阔的应用前景和不可估量的临床价值。

放射治疗是头颈恶性肿瘤治疗的主要手段之一。在头颈肿瘤放疗过程中，涎腺常直接暴露于照射野当中，几乎所有接受头颈部放疗的患者都会出现不同程度的涎腺功能低下或永久丧失，导致放射性口干，严重影响患者的生存质量。怎样才能预防和治疗涎腺放射损伤呢？这仍为目前医学界一大难题。近年来，壮药狗肝菜的现代药理学研究引起了人们的关注。前期研究表明：狗肝菜多糖（DCP）可增强放射后涎腺上皮细胞的增殖活性、减少细胞死亡，初步显示具有潜在的防辐射作用。主要内容:提取及精制DPC；检测涎腺细胞的生长活性、DNA双链断裂的变化，验证DCP是否可增强放射后涎腺细胞的生长活性及DNA双链断裂的修复能力；制作大鼠涎腺放射损伤模型，测定唾液流量、微血管密度（MVD）、检测细胞凋亡、观察涎腺组织学变化，研究DCP对治疗后涎腺放射性损伤组织学方面的改变；检测涎腺组织活性氧（ROS）、血管内皮生长因子（VEGF）、水通道蛋白（AQP）、P53蛋白的水平，研究DCP对放射后涎腺ROS、VEGF、AQP、P53水平的影响；检测放射后涎腺组织Mre11、Rad50、Nbs1表达水平，分析DCP对涎腺放射性DNA双链断裂（DSB）修复信号通路的影响。结果：1.成功制取狗肝菜多糖（DCP）：采用木瓜蛋白酶解法脱蛋白、双氧水氧化法脱色素法，经过DEAE-纤维素阴离子纤维素和Sephacryl S-300 HR柱层析分离出均一组分，高效液相渗透色谱法测定精多糖的分子量2.42×104D和纯度达95.22%。2. DCP上调涎腺组织VEGF、AQP5表达，下调ROS、P53水平，降低细胞凋亡，增加MVD，从而减轻大鼠涎腺放射性损伤。3.辐射诱导涎腺细胞DSB、 G2 期阻滞， 降低细胞存活率。浓度为 40-80 μ g/m L 的DCP通过对Mre11/Rad50/Nbs1信号通路的调节减轻放射性涎腺细胞DSB，通过减少细胞G2期阻滞比例来减轻涎腺放射性损伤。结论：DCP可能通过减轻放射性DSB、增加MVD、上调VEGF、AQP5表达水平及下调P53 、ROS水平等途径对涎腺放射性损伤具有一定的防护作用。壮药狗肝菜在广西地区来源丰富，易于培植生长。充分挖掘和利用具有民族特色的壮医药防治涎腺放射性损伤，无疑具有广阔的应用前景和不可估量的临床价值。