β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ调控胚胎着床机制的研究

聚糖（或糖链）结构、合成及其生物学功能为糖生物学研究热点。β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ既可催化糖苷键形成，调控蛋白质糖链结构和功能，又可作为细胞黏附分子参与细胞间识别、黏附、迁移，但是否参与胚胎发育、调控母-胎间识别未见报道。本研究拟用免疫荧光、Western blot、原位杂交、Real-time PCR技术①比较分析不同卵裂阶段小鼠的胚胎及围着床期子宫内膜β1,4-GalTⅠ的表达；②分析糖基转移酶表达规律与胚胎发育、着床相关性；借助小鼠体内（外）着床模型和利用人RL95-2细胞与人胚胎细胞模拟的"着床窗口期"，③以RNAi干涉β1,4-GalTⅠ表达观察对胚胎相关着床因子的调控，④分析β1,4-GalTⅠ参与着床网络及⑤对胚胎黏附、扩展、着床能力的影响；揭示β1,4-GalTⅠ调控胚胎发育介导胚胎、子宫内膜间识别、黏附的分子机制，为人类生育调控、助孕及抗着床技术发展提供糖生物学理论依据

β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ既可催化糖苷键形成，调控蛋白质糖链结构和功能，又可作为细胞黏附分子参与细胞间识别、黏附、迁移，但是否参与胚胎发育、调控母-胎间识别未见报道。本研究采用免疫荧光、Western blot、原位杂交、Real-time PCR技术比较分析不同卵裂阶段小鼠的胚胎及围着床期子宫内膜β1,4-GalTⅠ、OPN、着床相关因子的表达；分析糖基转移酶表达规律与胚胎发育、着床相关性；借助小鼠体内（外）着床模型和利用人RL95-2细胞与人胚胎细胞模拟的"着床窗口期"，以RNAi干涉β1,4-GalTⅠ表达观察对胚胎相关着床因子的调控，分析β1,4-GalTⅠ参与着床网络及激素调控，对黏附、扩展、着床能力的影响，分析OPN和β1,4GalT-Ⅰ在人体子宫内膜的表达、定位情况；检测在人OPN重组蛋白(rhOPN)在人子宫内膜癌细胞(RL95-2)中对β1,4GalT-Ⅰ表达的影响并分析rhOPN蛋白调节β1,4GalT-Ⅰ表达时所涉及的相关通路分子；检测rhOPN蛋白和β1,4GalT-ⅠsiRNA在体外胚胎着床模型中对胚胎和子宫内膜黏附的影响。揭示β1,4-GalTⅠ调控胚胎发育介导胚胎、子宫内膜间识别、黏附的分子机制，为人类生育调控、助孕及抗着床技术发展提供糖生物学理论依据。本课题发表论文7 篇，多次参加国内外学术会议，培养研究生9 名。