RNA干扰诱导血管紧张素原基因沉默治疗脑梗死的研究

背景：缺血性脑血管病是脑血管疾病当中的常见病与多发病，其治疗主要以溶栓、抗凝、抗血小板为主，预后效果不佳。肾素-血管紧张素系统是缺血性脑血管病发生的因素之一，我们之前的研究也发现了这一点。目的：本课题的目的是为了阐明利用RNA干扰技术诱导血管紧张素原基因沉默治疗缺血性脑血管的疗效。方法：我们将采用动物模型制作、分子生物学、病理诊断、ELISA等实验手段，研究缺血性脑血管病的大鼠模型中采用RNA干扰技术诱导血管紧张素原基因沉默的治疗方法与对照组之间的疗效差异，以探讨缺血性脑血管病新的治疗方案。意义：为今后临床治疗、防治缺血性脑血管病提供理论依据。

应用RNA干扰技术抑制大鼠主动脉内皮细胞表达的血管紧张素原（AGT）基因。应用RT-PCR法检测转染后AGTmRNA含量，发现干扰组与空白组以及阴性对照组相比mRNA的表达量明显下降(P<0.05)。通过western blot法检测干扰组的AGT蛋白表达受到抑制(P<0.05)。在细胞实验的基础上，我们又做了动物实验，进一步证实RNA干扰技术可以抑制AGT基因。RNA干扰沉默缺血再灌注大鼠的AGT基因，通过HE染色发现干扰组脑组织损伤不明显，空白对照组及阴性对照组脑组织出现缺血改变。通过RT-PCR干扰组与空白组及阴性组相比，电泳条带变浅。ELISA实验检测到干扰组大鼠血清AGT含量明显减少（P<0.05）。