lncRNA Cyrano对B淋巴细胞免疫异常的调控机制在系统性红斑狼疮中的作用

B cell hyperresponsiveness plays a critical role in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE). Our group previously demonstrated that B cell activation in SLE was associated with abnormal regulation of PTEN and PI3K/Akt pathways, mediated by increased expression of microRNA 7(miR-7). Blockade of miR-7 could suppress PI3K/Akt pathway and B cell activity. Preliminary studies confirmed that abnormal expression of miR-7 and PTEN in SLE were modulated post-transcriptionally. In addition, bioinformatic analysis revealed that lncRNA Cyrano were up-regulated in lupus and possessed binding sites for both miR-7 and PTEN. In-vivo experiments further proved the overexpression of Cyrano in B cells, correlating with disease progression in mice model. Therefore, Cyrano might contribute to B cell hyperresponsiveness in lupus and act as a therapeutic target. This project aims to further confirm the abnormal expression of Cyrano in B cells of lupus patients, to investigate the underlying mechanisms of Cyrano in modulating miR-7, PTEN and B cell dysfunction by siRNA interference and RIP pull-down, and to explore the therapeutic potential of Cyrano by siRNA.

B细胞异常活化增殖及分化在系统性红斑狼疮发病中有关键作用。申请人团队前期发现狼疮患者B细胞激活与PTEN、PI3K/Akt通路调节异常相关，主要受上游异常高表达的miR-7调控。阻断miR-7可阻止PI3K/Akt通路和B细胞激活。初步研究证实狼疮中miR-7和PTEN的表达异常均为转录后调控，生物信息学分析发现狼疮中差异表达的lncRNA Cyrano与miR-7、PTEN均存在结合位点。体内实验证明Cyrano在狼疮小鼠B细胞中显著高表达，且与疾病进展相关。推测Cyrano在狼疮B细胞免疫异常方面发挥作用，有望作为治疗干预靶点。本课题将进一步验证狼疮患者B细胞中Cyrano存在异常表达，通过体外实验siRNA基因干扰及RIP pull-down探讨Cyrano对miR-7、PTEN以及B细胞功能异常的调控作用，在狼疮小鼠中通过siRNA注射进一步验证Cyrano作为治疗靶点的可行性。

B细胞异常活化增殖及分化在系统性红斑狼疮发病中有关键作用。申请人团队前期发现狼疮患者B细胞激活与PTEN、PI3K/Akt通路调节异常相关，并可能受miR-7调控。本课题旨在验证mir-7的可能调控机制以及该通路作为治疗靶点的可行性。研究中发现mir-7在狼疮小鼠（MRLlpr/lpr）中显著上调，且直接靶向B细胞中PTEN的mRNA，对其进行负向调控。mir-7拮抗剂（antagomir）能够显著改善模型的狼疮表型，证实其可作为潜在治疗靶点。进一步机制分析证实mir-7拮抗剂能够纠正PTEN/AKT信号通路的异常，从而减少B细胞的异常分化。此外mir-7拮抗剂能够下调STAT3磷酸化和IL-21的生成，从而减少Tfh细胞增殖。通过生物信息学分析证实狼疮中差异表达的lncRNA Cyrano与miR-7、PTEN均存在结合位点。狼疮小鼠模型体内实验证明Cyrano在狼疮小鼠B细胞中显著高表达，且与疾病进展相关，证实Cyrano可能作为潜在治疗靶点。此外，在本基金的支持下我们同时开展了多个临床研究：1）在疫情期间对包括狼疮肾炎在内的多种肾病的管理、随访情况和策略进行了分析和总结，并验证了远程医疗在其中的可能意义。2）利用已发表的临床数据，我们对评估了慢性肾脏病（CKD）和急性肾损伤（AKI）对于新冠患者预后的影响，对肾病患者发展为重症新冠肺炎、不良预后的风险进行了荟萃分析，证实肾脏情况与新冠预后可能相关，提示我们在管理类似患者中需要额外关注其肾脏情况。3）结合目前国际上对慢性肾脏病（CKD）定义的讨论趋势，我们利用大数据对CKD的诊断标准进行了年龄调整，并估算了疾病负担的变化。4）肺囊虫肺炎（PCP）是特发性膜性肾病患者的一种威胁生命的机会性感染。这些患者长期接受免疫抑制药物治疗，但目前对于其PCP感染尚无系统研究。我们建立了一个膜性肾病的回顾性队列，对PCP感染的发生率及危险因素进行了系统分析；证实PCP在膜性肾病患者中并不罕见，需要进一步研究这些患者的预防和管理问题。以上结果均已经发表。