microRNA-204调控betaB2晶体蛋白在晶状体混浊进展中的作用机制研究

白内障是最常见的致盲原因之一，特征是晶状体混浊，深入研究晶状体混浊的调控机制，可为探索防治白内障新途径提供依据。前期研究表明，betaB2晶体蛋白的适度表达是维持晶状体功能的重要因素之一；miR-204可能调控betaB2晶体蛋白的表达。本课题拟在前期研究基础上，从miR-204对betaB2的表达调控入手，研究晶状体混浊进展的调控机制。首先利用生物信息学、染色质免疫沉淀、基因克隆等手段,研究miR-204的靶基因及其转录因子依赖性，明确miR-204对晶状体上皮细胞中betaB2表达以及细胞生物学功能的调控作用；进一步在动物模型上，通过注射腺病毒miR-204前体和抑制体，通过上调和抑制betaB2的表达，研究其对白内障发生、发展病程的体内调控作用。本研究可阐明betaB2晶体蛋白表达的miRNA调控机制，不仅具有学术意义，而且具有潜在的应用前景和社会效益。

白内障是最常见的致盲原因之一，是严重影响人类健康的常见病、多发病。由老化所引起的老年性白内障占有绝大部分的比例。miRNA在细胞的生长发育、增殖、分化、代谢和凋亡等生理过程中起重要作用。本课题组阐明miR-204和miR-326在人晶状体上皮细胞中的的功能和可能的分子机制。实时荧光定量PCR证明miR-204和miR-326在betaB2基因敲除小鼠（KO）中的表达量与野生型小鼠（WT）相比下调明显，提示miR-204和miR-326可能通过某种途径调控betaB2蛋白的表达。之后,经双荧光素酶报告基因实验证实miR – 204的下游靶基因为wnt4，miR - 326下游靶基因为FGF1。且miR – 204通过抑制wnt4从而抑制wnt4/β-catenin通路，最终抑制betaB2晶体蛋白的表达；而miR – 326则是通过抑制FGF1的表达而抑制betaB2晶体蛋白的表达。此外,白内障模型鼠的研究也支持上述结论。综上所述,通过抑制体内miR – 204、miR – 326的表达，分别上调wnt4与FGF1的表达量，最终上调betaB2蛋白量，为白内障的进一步研究提供借鉴性思路，并为白内障的预防和进程延缓提供新的干预靶点和治疗途径。