结核病高发区免疫基因标记物与结核感染关系的研究

结核病是全球重大公共卫生问题之一，中国结核病疫情仅次于印度居世界第二位，新疆是结核病的高发区。活动性结核与结核潜在感染的区分，以及在免疫低下人群中进行结核感染的鉴别是结核高发区结核病防控中的重大难题。前期本项目在美国的研究发现三个免疫标记物IL-8,FOXP3,IL-12β，在活动性结核与潜在感染中的表达存在显著差异，在此基础上，本项目拟在中国新疆收集结核患者，结核潜在感染者，儿童结核患者，结核合并艾滋病毒感染者及结核阴性者（对照组）样本，应用Real time PCR分析上述免疫标记物mRNA的表达。还将首次在结核病高发区，建立IL-9体外诱导PBMC产生抗原，特异性T调节细胞培养系统，探讨IL-9在结核感染中的免疫机制。为在结核病高发区建立特异、敏感，可区分活动性结核与潜在感染的方法，以及在免疫低下人群中进行结核感染的鉴别手段进行探讨，为寻找结核病高发区结核感染诊断新途径打好基础。

项目背景：结核病是全球重大公共卫生问题之一，活动性结核与潜在感染的区分是结核高发区结核病防控的重大难题。本项目前期发现IL-8、FOXP3、IL-12β在活动性结核与潜在感染中表达差异显著；主要研究内容：收集结核患者，潜在感染者，儿童结核患者，结核合并HIV者样本，应用Real time PCR测定IFN-、IL-12β、IL-9、FOXP3、IL-10、IL-6、IL-8和GUS的表达情况；另外还测定了儿童组的17个免疫标记物（IL-1b、IL-2、IL-15、IL-17、IL18、IL-21、IL-23、IL-27、IL-33、TNFα、Spil、IP10、TGFb1、Irf4、PD1、PD1-L1、IL-35）。重要结果：⒈儿童结核方面，①儿童活动性结核患者IL-9的表达显著升高（P<0.05），IFN-、IL-12β、FOXP3、IL-10、IL-6、IL-8在活动性结核患儿和潜在感染者间的表达均无显著差异（P>0.05），提示IL-9可能成为诊断儿童结核的免疫标记物；②结核患儿PD-1/PD-L1表达水平显著升高(P<0.05)，提示其可能在儿童结核致病机制中起重要作用；③IL-1b、IL-2、IL-15、IL-17、IL18、IL-21、IL-23、IL-27、IL-33、TNFα、TGFb1、Irf4在两组间的表达无显著差异；Spil、IP10在两组间的表达有显著差异（P<0.05）；④活动性结核患儿组IL-35表达明显降低（P<0.05），IL-35的增加可能对结核杆菌造成的机体免疫损伤起保护作用。⒉成人结核方面，IFN-、IL-12β、IL-9、FOXP3、IL-10、IL-6、IL-8、IL-9在成人活动性结核患者和潜在感染者中的表达无显著差异，但IL-9的表达随着感染史的增长有显著上升过程（P<0.05），其可能成为评价结核复发感染患者的免疫标记物。⒊结核和HIV合并感染方面：为筛选对HIV患者进行结核感染早期诊断的免疫标记物，本研究测定了结核合并HIV者IFN-、IL-12β、IL-9、FOXP3、IL-10、IL-6、IL-8的表达情况，此部分实验已完成，正在进行数据分析。总之，本项目通过筛选能够区分活动性结核与潜在感染的免疫标记物，为建立结核感染诊断新途径提供研究基础。