NRSF表达水平对抑郁模型小鼠行为的影响及其分子机制研究

The NRSF plays a significant role in neuronal functions, and involves in mental disorder and neurodegenerative diseases. In previous studies we found that the expression of NRSF in mice brain upregulated obviously in both neuroendocrine disturbances depression model and chronic unpredictable mild stress model. So we hypothesis that the over expression of NRSF will promote depression, and this phenomenon could be reversed by NRSF downregulation..In this research we will generated NRSF over expression mutant mice, and induce these depression models in both transgenic mice and wild type BALB/cJ mice. Lentivirus vector will be used to knock down the expression of NRSF, and behavioral tests, Elisa, fluorescence quantitative real-time PCR, western blot, immunofluorescence will be used to focus on 1) The expression of NRSF and its downstream effectors in mice depression models, 2) Effect of NRSF on depression-like behaviors in mice, 3) The comprehensive effect of downstream genes of NRSF in depression..This research will devote to illustrate how NRSF functioned in depression, which will also offer potential new therapeutic target to the therapy of depression.

神经元限制性沉默因子（NRSF）在多种神经功能中均有重要作用，并参与了众多精神疾病和神经退行性疾病。我们在前期研究中发现，神经内分泌干扰抑郁模型和慢性温和不可预知应激抑郁模型小鼠脑内NRSF表达水平显著提高，我们猜想NRSF过表达会提升小鼠抑郁倾向，而将其下调至正常水平能改善模型小鼠的抑郁情况。.本研究将构建NRSF过表达转基因小鼠，同时使用野生型BALB/cJ小鼠，建立上述两种抑郁模型；通过慢病毒干扰蛋白表达，使用行为学测试、Elisa、荧光实时定量PCR、蛋白免疫印迹、免疫荧光染色等技术，①分析NRSF及其调控的各类基因在抑郁模型小鼠中的表达情况；②研究NRSF表达水平对小鼠抑郁样行为的影响；③检测并分析NRSF调控的多种基因在抑郁症中的功能和作用机制。.本研究有助于理解NRSF基因在抑郁模型发病过程中的作用，丰富了抑郁症的理论研究，为抑郁症发病原因及治疗方法的研究提供新的思路和靶点。

NRSF是神经发育中的重要转录调控因子，同时也被报道具有神经保护功能，有可能作为抑郁症的生物标志物和治疗对策。在立项前期的研究中我们发现NRSF在抑郁模型小鼠脑中表达水平显著上升，猜测其可能会抑制下游相关神经特异基因表达，参与抑郁症发病机制。本项目使用皮质酮抑郁模型和慢性温和不可预知应激模型抑郁小鼠，检测调节小鼠脑海马区NRSF的表达水平能否引起小鼠抑郁样行为发生变化，并通过转录组学检测相关基因表达水平，分析NRSF蛋白及其调控的相关基因在小鼠抑郁症过程中的可能作用。在该项目研究中，1）成功筛选构建NRSF shRNA 慢病毒和NRSF过表达AAV，确立了小鼠皮质酮抑郁模型和CUMS模型方法；2）证实了调节NRSF在小鼠海马的表达，能够改善小鼠的抑郁样行为，小鼠强迫游泳时间减少；3）调节NRSF表达对于不同抑郁模型小鼠行为的影响是有差异的，皮质酮模型和CUMS模型小鼠的焦虑行为在过表达NRSF后发生不同的变化；4）正常小鼠敲低NRSF后，几乎没有基因表达发生改变，反应了NRSF在正常神经元中的功能；5）筛选比较了NRSF表达及CUMS模型引起的差异基因，其参与抑郁模型的作用及与NRSF的调控关系有待进一步调研和实验进行验证。.本课题项目揭示了NRSF表达水平在模型小鼠抑郁样行为中起到重要作用；神经营养因子基因和神经递质相关基因表达在这一过程中发生了显著变化。由于神经元损伤是抑郁症的重要特征之一，NRSF的神经保护功能可能在抑郁症机制和治疗研究策略上提供一定的帮助。.