由于GP67信号肽有较强的分泌能力,有利于外源基因表达,因此,将该基因克隆到柞蚕NPV表达载体pApM748的BamHI位点上,构成中间载体PApM748S;根据谷胱者苷肽硫转移酶(GST)基因序列合成相应引物,将BgLⅡ酶切点加在5’端,BamHI酶切点加在3’端,并克隆到pApM748S载体上,构建了pApM748SGl转移表达载体,其5’端BamHI/BgLⅡ焊死,3’端BamHI为外源基因克隆位点。人白细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因经修饰,在大肠杆菌中表达并具有活性,将该基因克隆到pApM748SG载体上这一重组质粒DNA和柞蚕NPV-DNA共转染作蚕蛹,经20天左右,蛹体发病,转染成功,重组病毒的挑选及表达工作还在继续。
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数据更新时间:2023-05-31
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