柞蚕NPV融合蛋白表达载体及产物纯化系统的建立

由于GP67信号肽有较强的分泌能力，有利于外源基因表达，因此，将该基因克隆到柞蚕NPV表达载体pApM748的BamHI位点上，构成中间载体PApM748S；根据谷胱者苷肽硫转移酶（GST）基因序列合成相应引物，将BgLⅡ酶切点加在5’端，BamHI酶切点加在3’端，并克隆到pApM748S载体上，构建了pApM748SGl转移表达载体，其5’端BamHI/BgLⅡ焊死，3’端BamHI为外源基因克隆位点。人白细胞集落刺激因子（GM-CSF）基因经修饰，在大肠杆菌中表达并具有活性，将该基因克隆到pApM748SG载体上这一重组质粒DNA和柞蚕NPV-DNA共转染作蚕蛹，经20天左右，蛹体发病，转染成功，重组病毒的挑选及表达工作还在继续。