益肾调督法对AD模型大鼠神经元轴突生长的影响及针灸作用机制研究

Axonal abnormalities is a key to Alzheimer's disease pathology mechanism. The Mitochondria not only is an important new targets to the Aβ toxicit, but also mitochondrial function and its dynamic process has very important significance in biology on axon growth. Axonal abnormalities associated with mitochondrial damage, and will increase the A beta neurotoxicity, cause and accelerate the occurrence and development of AD. Axonal abnormalities is relevant with mitochondrial damage, it will increase the neurotoxicity of Aβ, which cause and accelerate the occurrence and developement of AD. In this paper,based on the previous work, by intraventricular injection of Aβ1-42 induced the AD model rat, using molecular biology techniques, in order to mitochondrial damage induced axonal abnormalities as the breakthrough point, discuss on abnormal mitochondrial structure and function and related protein's regulation to the axonal abnormalities of neuron in AD; Analysis the effection on protecting the mitochondrial to axonal growth and learning and memory;To provide new information on improving the function of learning and memory by acupuncture and moxibustion; Further,from the neuron's protection , we will discuss the mechanism on that acupuncture and moxibustion can lessen the axonal abnormalities induced by mitochondrial's damage, which provide more clues to better investigate,on acu-moxibustion prevent and cure Alzheimer's disease.

轴突异常是阿尔茨海默病形成与发展的关键，线粒体不仅是Aβ发挥毒性作用的重要靶位，且线粒体功能及其动力学过程对轴突生长具有十分重要的生物学意义。轴突异常与线粒体损伤有关，且会加重Aβ神经毒性，导致并加速AD的发生与发展。本课题拟在前期益肾调督防治阿尔茨海默病的研究工作基础上，以脑室内注射Aβl-42诱导AD模型大鼠为对象，采用相关分子生物学技术，首次从线粒体损伤诱导轴突异常的角度，探讨线粒体结构与功能的异常及相关蛋白在AD神经元轴突异常过程中的作用机制，分析保护线粒体对轴突生长的影响及其在学习记忆过程中的作用，为深入揭示针灸改善学习记忆功能的作用机制提供全新资料；进一步从对神经元保护角度探讨针灸有效减轻线粒体损伤诱导轴突异常的作用机制，为更好的研究针灸多环节、多靶点的防治AD作用机制提供更多的线索。

轴突异常是阿尔茨海默病形成与发展的关键，线粒体不仅是Aβ发挥毒性作用的重要靶位，且对轴突生长具有十分重要的生物学意义。本课题在前期研究基础上，以脑室内注射Aβ1-42诱导AD模型大鼠为对象，采用相关分子生物学技术，首次以线粒体损伤诱导轴突异常为切入点，探讨线粒体结构与功能的异常及相关蛋白在AD神经元轴突异常过程中的机制作用，为深入揭示针灸改善学习记忆功能的作用机制提供更多资料。结果显示海马神经元线粒体形态呈卵圆形，数目较少，且分布不均，内嵴大部分排列紊乱，部分可见内嵴溶解消失，基质疏松，线粒体肿胀明显且部分空泡变性；周边内质网扩张，提示线粒体结构损坏较为严重；AD模型大鼠血清Aβ浓度显著升高，脑内海马区的APP阳性神经元表达增多），提示AD模型大鼠复制成功，出现Aβ蛋白沉积和Aβ降解酶减少。线粒体中ABAD的含量明显高于正常组（P<0.01），Aβ淀粉样蛋白与位于海马神经元线粒体基质中过表达的ABAD结合，形成过多的Aβ-ABAD复合物，使COXⅣ水平明显下降，与正常组相比具有明显的差异，进而导致过多的ROS从线粒体中漏出，ATP降低，氧化呼吸链的电子传递受阻，可见线粒体能量代谢障碍；线粒体融合相关蛋白Opa1的水平明显低于正常组，而线粒体分裂相关蛋白Fis1的水平明显高于正常组，提示线粒体分裂与融合失衡，线粒体动力学出现异常；作为线粒体通透性转换孔的必需成分之一的亲环蛋白D的过表达，也提示MPTP的开放，线粒体膜内外渗透失衡，线粒体功能受到严重抑制。而益肾调督针灸法能够抑制AD模型大鼠海马线粒体形态结构的改变；通过抑制ABAD的过表达，减少Aβ-ABAD复合物的产生，进而提高COXⅣ的活性，改善氧化呼吸链的电子传递，抑制线粒体能量代谢障碍；通过抑制线粒体分裂蛋白Fis1的过表达，促进线粒体融合蛋白Opa1的表达，进而调节线粒体分裂与融合的平衡，改善线粒体动力学异常；通过抑制线粒体通透性转换孔的必须成分之一CypD的过表达，进而抑制MPTP的开放，调节线粒体膜内外渗透的失衡；最终上调轴突生长因子Netrins的表达，下调轴突生长抑制因子MAG与OMgp的表达，在促进细胞内外β淀粉样蛋白的降解，减少其聚集沉降的基础上，进一步保护神经元，改善阿尔茨海默病病理进程。