钩吻素子抗神经病理性疼痛的作用及其与脊髓神经活性甾体3α,5α-四氢孕酮的关联

防治神经病理性疼痛(NPP)新型药物以及新的药物作用靶标与途径亟待研究。脊髓神经活性甾体3α,5α-四氢孕酮(3α,5α-THP)在NPP中的作用日益受到重视。我们前期工作提示钩吻素子可能具有抗NPP作用。本项目拟在多种大鼠外周NPP模型上，进一步明确钩吻素子抗外周NPP的作用及其特点，以期提出钩吻素子抗NPP作用的可能新功效。在此基础上，首先探讨钩吻素子抗NPP作用与其调控脊髓背角3α,5α-THP水平的关系，探求其作用的关键效应分子；进而深入探索钩吻素子抗NPP作用与其调节脊髓背角3α,5α-THP合成关键酶3α-羟化类固醇脱氢酶的关联，明确其作用的靶标；最后分析钩吻素子上调的脊髓3α,5α-THP是否通过激动脊髓GABA-A受体而发挥抗NPP作用，以期阐释钩吻素子抗NPP作用的脊髓分子机制，为防治NPP的新药研发提供新的药物作用靶标与作用途径，并有助于深化理解NPP的中枢机制。

摘要：防治神经病理性疼痛新型药物以及新的药物作用靶标与途径亟待研究。脊髓神经活性甾体3α,5α-四氢孕酮在神经病理性疼痛中的作用日益受到重视。我们前期工作提示钩吻素子可能具有抗神经病理性疼痛作用。本项目分别在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤模型和大鼠脊神经结扎等外周神经病理性疼痛模型上，首次观察到钩吻素子具有显著的抗神经病理性疼痛效应，有效作用持续时间长，其抗热痛敏ED50约为0.79-0.86 mg/kg，抗机械痛敏ED50约为1.13-1.58 mg/kg，而钩吻素子小鼠皮下注射LD50为99 mg/kg，表明钩吻素子具有高效低毒抗神经病理性疼痛作用新功效。在此基础上，优先发现钩吻素子抗神经病理性疼痛作用与其提高腰段脊髓背角内神经活性甾体3α,5α-四氢孕酮（别孕烯醇酮）的水平有关，提示后者可能是钩吻素子抗神经病理性疼痛作用相关的关键效应分子。3α-羟化类固醇脱氢酶是3α,5α-四氢孕酮合成的关键酶，本研究接着发现钩吻素子可能通过增强脊髓背角3α-羟化类固醇脱氢酶，包括酶表达与酶活性，进而上调3α, 5α-四氢孕酮水平从而发挥抗神经病理性疼痛作用，3α-羟化类固醇脱氢酶可能是钩吻素子调控脊髓背角3α, 5α-四氢孕酮水平的重要作用靶点。脊髓GABA-A受体在神经病理性疼痛调控中起者重要作用，3α, 5α-四氢孕酮可通过直接作用于GABA-A受体，立体选择性正性别构调节激动GABA-A受体。本研究尚发现钩吻素子上调脊髓3α,5α-四氢孕酮后可能通过激动脊髓GABA-A受体而发挥抗神经病理性疼痛作用。综上，本研究提示钩吻素子抗神经病理性疼痛作用脊髓分子通路可能为钩吻素子→3α-羟化类固醇脱氢酶→3α,5α-四氢孕酮→GABA-A受体→抗神经病理性疼痛，这些研究成果有助于阐释钩吻素子抗神经病理性疼痛作用的脊髓分子机制，为防治神经病理性疼痛的新药研发提供新的药物作用靶标与新的药物作用途径，并有助于深化理解神经病理性疼痛的中枢机制。