MicroRNA在胚胎干细胞向心肌细胞定向分化过程中的作用及其机理研究

非编码RNA尤其是miRNA在胚胎干细胞分化过程中的具体作用目前知之甚少。本课题组拟采用小鼠胚胎干细胞向心肌细胞定向分化的模型研究此过程中miRNA所起的作用。采用miRNA、转录因子和基因芯片筛查分化前后基因的表达改变情况，运用生物信息学做分类整理和转录因子及靶基因的预测，建立相关数据库。挑选表达差异较大的miRNA运用细胞生物学、分子生物学方法验证其可能的转录因子和靶基因。选取其中感兴趣的miRNA在胚胎干细胞分化过程中人为干预其表达，运用定量PCR、Northern Blot、Western Blot等研究细胞表型，其转录因子和靶基因的表达以及相关信号通路的活性。最终建立一个该体系中miRNA及其转录因子和靶基因的调控网络和相关数据库，结果将有助于阐明miRNA在干细胞定向分化过程中所起的作用，为有效控制干细胞定向分化寻找新的靶点,进而为治疗相关疾病提供新的思路。