用PCR方法从人胎盘细胞cDAN库获得编码胰岛素受体α亚基中结合胰岛素的相对独立的结构域L1和L2以及人工设计的L1-(Ala)10-L2的基因,在大肠杆菌系统中诱导表达成功。DNA测序、氨基酸组成分析以及蛋白质氨基端测序证明所表达的蛋白正确。经过包涵 体的洗染、纯化、溶解和蛋白复性,得到了受体的胰岛素高亲和结构域L2、低亲和结构域L1及10个丙氨酸相连的两结构域,它们都远小于α亚基且不致由于链间二硫键的形成而聚集,可以克服他人遭遇的由于α亚基太大和链间交联而形成的困难,为进一步研究“胰岛素-受体(结构域)”复合物的性质,探索复合物的结晶打下了良好的基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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