高原低氧环境中Wnt抑制基因甲基化在胃癌预后中的作用及机理研究

Gastric cancer is the second cause of death accounting for all kinds of cancer in China and the world, and the number of deaths in China accounted for 44% in the world，and the incidence of gastric cancer in Tibetan population was significantly higher than that in Han population. Currently, chemotherapy is still the main therapy for gastric cancer treatment. However, gastric cancer has a strong resistance to chemotherapy and radiotherapy, the 5-year survival rate is only 20%. In order to improve the treatment and reduce toxicity for patients with gastric cancer in Tibetan population, Identifying a reliable prognostic molecular markers is crucial. Wnt signaling pathway plays an important role in gastric cancer development and migration. The methylation of Wnt suppressor gene is an important mechanism for aberrant activation of Wnt signaling pathway. This project aims to systematic study the relationship between Wnt suppressor gene methylation and mRNA expression, and the association of the inhibitor gene with clinical and pathological features of gastric cancer in Tibetan population，and the function of the gene in Wnt signaling pathways and its effects on tumor cells growth will be studied by over expression and siRNA technology. Finally, the possibility that the gene as a potential target for the gastric cancer treatment will be explored by nude models, providing a reliable theoretical foundation for the targeted treatment of gastric cancer in Tibetan population.

胃癌死亡率在世界和中国均占各类肿瘤死因的第二位，其中中国胃癌死亡人数占世界的44%，而藏族人群胃癌发病率明显高于汉族。目前，化疗仍是胃癌主要的治疗方法。但是由于大部分胃癌患者对放化疗不敏感，其5年存活率仅有20%。为了最大程度的提高胃癌患者的治疗效果，减少毒副反应，寻找判断预后可靠的分子标志物就至关重要。Wnt信号通路在胃癌的发生、发展、迁移中扮演着重要角色。其中Wnt抑制基因高甲基化导致基因沉默，是Wnt信号通路异常活化的重要机制。因此，本项目拟系统的研究藏族胃癌标本Wnt抑制基因甲基化及mRNA表达的关系及其与胃癌临床病理特征、预后之间的关系，在找到了预后指导分子之后，进一步通过过表达及siRNA技术详细研究该基因在信号通路所起的关键作用以及对肿瘤细胞生长的影响，再通过裸鼠移植模型探讨该基因作为治疗胃癌患者潜在靶点的可能性，从而为藏族胃癌患者的靶向治疗提供可靠的理论依据。

胃癌死亡率在中国及其他国家均位于各类肿瘤死因的第二位，而中国藏族人群胃癌发病率明显高于汉族。且由于大部分胃癌患者对放化疗不敏感，其5年存活率仅有20%。为了最大程度的提高胃癌患者的治疗效果，减少毒副反应，寻找判断预后可靠的分子标志物就至关重要。Wnt信号通路在胃癌的发生、发展、迁移中扮演着重要角色。其中Wnt抑制基因高甲基化导致基因沉默，是Wnt信号通路异常活化的重要机制。这提示抑制Wnt抑制基因高甲基化状态可能是降低Wnt信号通路异常活化的关键点。因此，我们预测到SFRP1、DKK1、WIF基因与Wnt抑制基因启动子区的CpG岛相关。并进行统计分析发现Wnt抑制基因DKK1未甲基化组与甲基化组相比生存期明显加长，提示DKK1很有可能成为胃癌的一个预后分子。DNMT1 主要负责维持DNA 甲基化的状态，我们研究表明，靶向沉默SGC-7901细胞中DNMT1，对SGC-7901细胞增殖、周期、迁移均有显著抑制作用，对SGC-7901细胞凋亡有显著促进作用。此外，NGS 甲基化检测实验结果表明 siRNA-DNMT1减少了细胞内Wnt信号通路β-catenin蛋白的表达的同时也抑制基因启动子CpG位点的甲基化。我们发现降低DNMT1表达，可减轻Wnt抑制基因甲基化从而减少Wnt信号通路的异常活化，最终影响胃癌的发展。此研究有助于阐明Wnt抑制基因甲基化在胃癌预后中的作用机理。为监测胃癌预后标志物提供新位点。