LASS2与V-ATPase质子泵相互作用诱导肝癌细胞凋亡和抑制其转移的分子机制

肝癌等人类恶性肿瘤所具有的生长失控和侵袭转移特性是肿瘤临床治疗失败的根本原因，研究和发现肝癌等人类恶性肿瘤发生发展和侵袭转移规律，可为改善肝癌等人类恶性肿瘤的临床治疗效果提供新的有效手段。我们前期研究发现：(1)LASS2可与V-ATPase（Vacuolar H+-ATPase）质子泵复合体的c亚基ATP6L相互结合，并抑制肝癌细胞的克隆形成(colony formation)和抑制肝癌细胞生长,但机理不明；(2)采用RNAi技术干扰V-ATPase质子泵的ATP6L亚基、抑制V-ATPase质子泵功能后，可阻止肿瘤酸性微环境的形成并抑制肝癌转移。本项目拟在前期发现的基础上，深入研究LASS2与V-ATPase质子泵相互作用的分子机制，探讨LASS2抑制肝癌生长的分子途径及其与V-ATPase质子泵结合后抑制肝癌侵袭转移的分子机理，为肝癌等人类恶性肿瘤生长和侵袭转移研究打开新思路。

耐药产生是肿瘤化疗中亟待解决的问题。大量研究表明，肿瘤酸性微环境是耐药形成的重要原因。通过本项目研究，我们发现耐药肿瘤细胞株中LASS2表达情况显著低于药物敏感肿瘤细胞株。同时，LASS2表达低的肿瘤病人预后差。我们的结果表明，在耐药肿瘤细胞中过表达LASS2可以增加肿瘤细胞对包括阿霉素在内的多种化疗药物的敏感性；在药物敏感肿瘤细胞中干扰LASS2可以降低肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。细胞周期分析结果显示，LASS2过表达的肿瘤细胞联合阿霉素处理后细胞凋亡增多。由此表明LASS2过表达增加了肿瘤细胞对阿霉素的敏感性。过表达LASS2以后，可以使肿瘤细胞外的pH（pHe）和溶酶体的pH显著增加，使更多的阿霉素进入到肿瘤细胞内，并且聚集在细胞核内。裸鼠成瘤实验表明，过表达LASS2联合阿霉素处理可以显著地抑制异种移植肿瘤的生长。我们的结果表明，LASS2在化疗疗效中起一定的作用，同时LASS2低表达预示着肿瘤化学耐药性的存在。