中药肉豆蔻中赭曲霉毒素A及其隐蔽型真菌毒素的感染机理及防控研究

Based on the previous studies that Traditional Chinese Medicine Myristicae Semen was susceptible to be contaminated by Ochratoxin A, which has high toxicity. Myristicae Semen is an edible Traditional Chinese Medicine, which easily causing toxin accumulation whithin a small amount of ingestion and do huge harm to human’s health. Ochratoxin A has a conjugated body, masked mycotoxins, which can be converted into ochratoxin A through metabolism which can be also a potential risk. At present, there has not been a deep study about the infection mechanism of Ochratoxin A and its masked mycotoxins in Myristicae Semen yet. Considering the fact that Ochratoxin A and its masked mycotoxins belong to one kind of mycotoxins, and the growth status of toxic fungi affects the production level in Myristicae Semen. Based on these, in this project we intend to study on the following aspect—⑴To figure out how typies and quantity of Ochratoxin A and its masked mycotoxins contaminated in Myristicae Semen related to their active ingredients and factors like preparation technology and storage condition. ⑵To isolate and identify toxic fungal strains. ⑶To investigate the toxin-producing ability and rules of different toxic fugal strains. Through analysis and research, this project will reveal the cause and infection mechanism of ochratoxin A and its masked mycotoxins in Myristicae Semen, providing prevention and control countermeasures , aiming to ensure better safety use of Myristicae Semen.

前期研究发现中药肉豆蔻易感染赭曲霉毒素A，赭曲霉毒素A具有高毒性。而肉豆蔻为药食两用的香辛料，少量多次的摄入易造成毒素蓄积，有严重的安全性隐患。另赭曲霉毒素A存在共轭体即隐蔽型真菌毒素，其通过体内代谢等途径可转化为赭曲霉毒素A，也是一潜在风险，不容忽视。目前肉豆蔻中赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素的感染机理尚缺乏深入研究。基于赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素是一类真菌毒素，产毒真菌的生长状态影响该毒素的产生与水平，本项目拟研究肉豆蔻中赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素感染水平的动态变化与肉豆蔻化学成分、炮制加工和贮藏条件等因素的关联性；并筛分产毒菌株、基因鉴定菌株，采用不同基质培养菌株，研究其产毒能力，明确最适合产毒的条件。本项目将揭示肉豆蔻中赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素的感染原因和机理，为肉豆蔻感染赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素提供防控对策，更好保证用药安全。

前期研究发现中药肉豆蔻易感染具高毒性的赭曲霉毒素A，有严重的安全性隐患。另赭曲霉毒素A存在共轭体即隐蔽型真菌毒素，可转化为赭曲霉毒素A，存在潜在危害，不容忽视。.本项目对肉豆蔻的种植、采收加工、贮藏及流通条件等环节进行了调研考察。确定了赭曲霉毒素A的隐蔽型毒素为赭曲霉毒素B，建立了肉豆蔻中赭曲霉毒素A及其隐蔽型毒素（以下简称赭曲霉毒素）的液质联用技术检测方法，对肉豆蔻中赭曲霉毒素的感染状况开展了研究并进行了内外部因素的相关分析，确定了肉豆蔻产毒菌株并非内生菌，而干燥加工过程为感染赭曲霉毒素的重要环节。.筛分肉豆蔻中赭曲霉毒素的产毒菌株，得到1株产毒菌株，根据形态鉴定和基因测序鉴定为菌核曲霉。.对产毒菌株分别考察了碳源、氮源、温度、湿度等因素对产毒能力的影响。研究了以新鲜成熟肉豆蔻果实及干燥与贮藏过程中不同状态的肉豆蔻果实，将其区分部位分别作为培养基质，产毒菌株产毒能力的变化，揭示了肉豆蔻中赭曲霉毒素产毒菌株的产毒规律，发现了肉豆蔻的水活度是影响肉豆蔻中产毒菌株产毒量的关键因素。.模拟了肉豆蔻采收加工、炮制及贮藏等不同条件，考察了各环节中不同因素与肉豆蔻中赭曲霉毒素感染水平的关联性，揭示肉豆蔻易感染赭曲霉毒素的原因和机理，发现肉豆蔻采收后的干燥过程是其感染赭曲霉毒素的关键环节。.本项目研究时还发现肉豆蔻在贮藏与流通环节中还具有感染其他真菌毒素的风险。根据研究结果，针对肉豆蔻加工贮藏及流通各具体环节，提出了肉豆蔻采收时应避免在降雨或晨露或傍晚等水分含量较高时；已长霉菌的鲜果应及时剔除；采收后立即干燥，避免长时间堆放，晾晒时保证日晒和通风，及时翻动等系列防控对策，并建立了同时检测肉豆蔻中21种真菌毒素的液相色谱-串联质谱方法，供肉豆蔻及其相关制剂进行真菌毒素感染水平的监控，以有效采取防控措施。.本项目揭示了肉豆蔻易感赭曲霉毒素的产毒条件与机理，为科学防范中药中感染真菌毒素提供了理论依据和研究模型。