脂肪酸酰化位置对动脉粥样硬化的内皮和平滑肌细胞功能及脂筏脂肪酸构成的影响

脂肪酸在脂类中的酰化位置分布对于脂肪的营养是非常重要的影响因素，脂肪酸的位置分布决定着脂类的吸收、代谢和功能。脂肪酸的吸收因其在酰化位置的分布不同而产生差异，动脉粥样硬化的形成与脂肪酸的摄入量有很大影响，那么脂肪酸的酰化位置不同造成脂肪酸的吸收差异与动脉粥样硬化之间必然存在一定的关联。本实验拟探讨一种脂肪酸酰化位置的测定方法，利用酶解技术将甘油三酯和磷脂不同酰化位置的脂肪酸分别水解，测定其各个位置上脂肪酸的组成及含量等。研究18：0、18：1、18：2分别位于SN-2位和SN-1、SN-3位的甘油三酯对血管内皮细胞和平滑肌细胞联合培养模型的作用和影响，对细胞膜脂筏的分布及其对脂筏主要组分（胆固醇、鞘磷脂和标志性蛋白）分布的影响，对细胞膜脂筏的脂肪酸构成的影响，探讨脂肪酸酰化位置与动脉粥样硬化的关系，为动脉粥样硬化的形成机理提供科学数据。

本基金的研究主要是探讨不同甘油三酯与平滑肌细胞和内皮细胞功能之间的关系。研究包括了以下内容：（1）建立了甘油三酯和磷脂中脂肪酸酰化位置分析方法。通过纯化，胰脂肪酶、磷脂酶对甘油三酯的酶解，反应产物的分离，气相色谱法测定了脂肪酸的含量。（2）采用氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导人脐静脉平滑肌细胞和内皮细胞建立了动脉粥样硬化细胞模型，探讨三硬脂酸甘油酯、三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯对被诱导细胞功能的影响。用 MTT 法测定细胞的增殖，观察不同饱和度的单纯甘油酯对 ox-LDL 诱导细胞增殖与迁移的影响。采用PCR和Western Blotting分别测定不同甘油三酯对内皮细胞粘附因子ICAM-1和E-selectin的基因和蛋白的表达量的不同。测定不同甘油三酯对平滑肌细胞中 PCNA 、SM-α-actin 、MCP-1 基因和蛋白表达的影响，探讨酰化位置不同的甘油三酯对动脉粥样硬化的影响机制。（3）通过测定甘油酯作用前后模型中丙二醛以及超氧化物歧化酶的含量变化，初步探讨单纯甘油酯对AS模型中内皮细胞的作用机制。（4）建立了血管内皮细胞和平滑肌细胞联合培养模型，采用两种不同的联合培养方法来研究甘油三酯的作用，并分别检测了甘油三酯对两种模型下的内皮细胞功能的影响。. 主要研究结果表明，三硬脂酸甘油酯对 ox-LDL 诱导细胞的增殖与迁移有着明显的促进作用，诱导作用呈现时间和剂量的依赖关系，对动脉粥样硬化进程有一定的促进作用。而三油酸甘油酯和三亚油酸甘油酯可以抑制 ox-LDL 诱导增殖的细胞增殖，减少细胞迁移距离，对动脉粥样硬化进程有一定抑制作用。. 研究实验由于18：0、18：1、18：2分别位于SN-2位和SN-1、SN-3位的甘油三酯难以获得，调整为单纯甘油三酯（三油酸甘油酯、三亚油酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯）。细胞联合培养和脂肪酸在细胞膜脂筏的分布研究还在进行中，目前没有获得研究结果。研究发表了SCI收录论文3篇，1篇外文已被Lipids接收等待发表，中文核心期刊论文1篇，硕士论文2篇。