同轴电纺PEG/PCL纳米膜控释VEGF竞争结合受体干预大鼠70%肝切除后余肝再生

肝窦血管内皮细胞（SEC）增殖是肝切除后肝再生完成的必要前提，我们的前期研究显示大鼠70%肝切除后血管内皮生长因子（VEGF）及受体在72－120h内的低表达可能是制约SEC增殖的主要因素,可能存在早期较低水平VEGF首先以同肝细胞上的受体Flt－1结合为主，促进肝细胞释放VEGF，在VEGF浓度增加后再同SEC上的FLK/KDR受体结合为主，从而启动SEC增殖。如能在肝切除后立即给予持续足够浓度的外源性VEGF，使VEGF与两种受体的结合尽快达到最大饱和，可能加速SEC增殖。利用放射受体分析及Scatchar计算，有助于验证该工作假说，同时针对现有外源性VEGF应用手段的缺陷，设计的可控释VEGF的具有核壳结构（core－shell）的PEG/PCL中空电纺纳米纤维膜，可在体内外高效可控释放，有助于从受体竞争角度阐明外源性VEGF促进肝再生现象的科学机制，并将为干预肝再生提供实验依据。

术后肝再生过程中肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cell，SEC）的增殖滞后于肝细胞，造成肝血窦重建延迟，导致早期肝再生不足。血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）具有特异性刺激SEC增殖的作用，是调控肝再生的重要因子之一。术后余肝的内源性VEGF表达不足是抑制早期SEC增殖的关键因素。研究发现术后给予外源性VEGF干预可促进余肝再生。但是目前定向输送外源性VEGF至残余肝组织缺少有效方法，外源性VEGF的促肝再生效率有待提升。为此，我们设计了一种负载外源性VEGF的可降解生物相容性高分子中空纳米纤维，采用静电纺丝技术纺制成网筛状，最后用蛋白胶原包裹制备成膜状结构（代号NF-VEGF），用于术后植入到余肝创面上。我们评估了NF-VEGF在体外的释放效率及与肝细胞、SEC的体外相容性，以及在大鼠70%肝切除模型上的促肝再生效应。研究发现，NF-VEGF干预可使术后肝细胞的分裂和增殖高峰提前24 h出现。而且，NF-VEGF干预能明显提高术后余肝内VEGF浓度，上调术后余肝VEGF mRNA、VEGF受体flt-1和KDR/flk-1的表达。但是，由于术后早期肝淤血和水肿的影响，NF-VEGF干预对术后余肝重量的恢复没有显示出明显差异。我们得出结论，可降解生物相容性NF-VEGF与肝细胞、SEC生物相容性良好，可在体内持续高效释放外源性VEGF，刺激余肝SEC的增殖，加速肝血窦重建，促进肝再生完成，有望成为干预肝再生的一种有效策略。