远端阿片预处理心肌保护作用的中枢NO-cGMP-PKG信号传导机制研究

中枢远端阿片预处理可以模拟远端缺血预处理对心脏缺血后损伤发挥保护作用。本项目基于申请者前期研究基础上，探讨鞘内远端阿片预处理对缺血再灌注损伤心肌保护的中枢神经系统信号传导通路的机制。研究内容包括：（1）利用鞘内微量注射技术，以远端预处理的方式脊髓鞘内（或硬膜外腔）注入阿片类镇痛药（吗啡或芬太尼），观察其对心脏缺血再灌注损伤的影响。（2）中枢鞘内给予三种阿片受体激动剂或阻断剂，探讨中枢三种阿片受体在远端阿片预处理中的作用。（3）中枢鞘内给予NO-cGMP-PKG信号通路各自特异阻断剂，探讨中枢NO-cGMP-PKG信号通路参与介导远端阿片预处理的作用。（4）利用细胞分离技术和心肌细胞代谢抑制模型观察鞘内远端阿片预处理对缺血后心肌细胞内钙稳态的影响。"远端阿片预处理"是一个全新的概念，深入研究远端阿片预处理作用机制，将为其在临床得到安全、合理应用提供理论依据和指导。

远端缺血预处理心肌保护作用与阿片受体参与介导有关，并且鞘内以远端预处理的方式注射吗啡可以模拟远端缺血预处理效应。但远端阿片预处理的具体机制研究甚少。本研究探讨中枢阿片受体在缺血预处理、远端缺血预处理和创伤远端预处理心肌保护作用中的角色研究；利用鞘内微量注射技术，以远端预处理的方式脊髓鞘内注入阿片类镇痛药（吗啡或芬太尼），观察其对心脏缺血再灌注损伤的影响及心脏信号机制；在鞘内远端阿片预处理前，中枢鞘内给予NO-cGMP-PKG信号通路各自的特异抑制剂，探讨中枢NO-cGMP-PKG信号通路参与介导远端阿片预处理的作用。研究发现中枢阿片受体参与介导远端缺血预处理和创伤远端预处理心肌保护作用，并不参与缺血预处理效应；远端阿片预处理减轻心肌缺血再灌注损伤与心脏PI3K-AKT-eNOS信号途径的抗凋亡机制有关；脊髓中枢NO-cGMP-PKG信号通路可能参与介导远端阿片预处理心肌保护作用。以上研究成果首次揭示远端阿片预处理的心肌保护作用机制，将为其在临床得到安全、合理应用提供理论依据和指导。