高甘油三酯血症合并急性胰腺炎临床易感性代谢表型研究

高甘油三酯相关性急性胰腺炎临床进展凶险、死亡率高，其发病机制迄今尚未阐明。代谢组学作为高通量、高精确度的系统生物学方法，在疾病的研究中已经取得了很多重要成果。本课题组在前期的研究中发现高甘油三酯血症合并急性胰腺炎的患者确实存在着特征性代谢谱。因此，有必要对其代谢表型进行深入的系统研究。本课题组拟对脂蛋白脂酶基因敲除小鼠（LPL-/-）合并急性胰腺炎模型以及高甘油三酯血症合并急性胰腺炎临床病例采用基于质谱的代谢组学分析技术，获取相关代谢表型的化学组成信息，建立多源化学图谱，提取高甘油三酯血症合并急性胰腺炎生物标志物特征谱；并明确高甘油三酯血症合并急性胰腺炎的临床易感性。为临床高血甘油三酯血症合并急性胰腺炎的病情预警和有效治疗提供新的思路。

高甘油三酯相关性急性胰腺炎（HLP）临床进展凶险、死亡率高，其发病机制迄今尚未阐明。运用基于质谱（MS）的分析技术，从动物和人体层面分别研究HLP发病过程中的代谢组、蛋白组变化规律，进而利用生物信息处理技术发现HLP的化学与生物模式特征。.一、LPL+/-小鼠HLP模型研究： . 使用雨蛙肽诱发小鼠急性胰腺炎（AP），分为：WTC组（野生型小鼠对照组），LDC组（LPL+/-小鼠对照组），WTT组（野生型小鼠AP模型对照组），LDT HLP组。检测血浆甘油三酯、淀粉酶，观察胰腺形态及GC/MS分析。结果提示LPL+/-小鼠甘油三酯、淀粉酶水平较野生型有显著差异；HLP组病理评分较WTC组有差异； HLP组与WTT组间相关代谢产物表达显著差异。研究提示LPL+/-小鼠存在高三酰甘油血症，AP的易感性增加；健康小鼠与LPL+/- HLP小鼠之间代谢产物存在差异。.二、高三酰甘油血症患者、HLP患者和正常对照的代谢组学研究。.取39例HLP患者及39例健康人尿样，24名HLP患者、39名健康者的血清、尿液，利用OPLSA-DA、GC/MS的分析方法，观察各患者的代谢轮廓。结果发现尿样中马尿酸、对-羟基苯乙酸、谷氨酸含量下降；苯丙氨酸、酪氨酸、赖氨酸、组氨酸等含量上升。研究提示三羧酸循环、肠道菌群结构、交感神经系统活性等发生改变。.三、高脂血症对胰腺组织损伤机制的蛋白质组学分析.诱导大鼠高脂血症及HLP模型，使用免疫组化、相差凝胶电泳和质谱分析方法，通过胶内酶解进行质谱鉴定、生物信息库检索得到胰腺差异蛋白质的结构、生物学功能。高脂血症和正常胰腺组织的差异蛋白主要有脂肪消化相关蛋白、细胞能量代谢及氧化应激相关蛋白、细胞增殖与分化相关的蛋白、胶原合成相关蛋白。高脂血症相关急性坏死性胰腺炎（ANP）、急性水肿性胰腺炎（AEP）分别上调蛋白质23种、2种，下调16种、5种；在高脂血症相关ANP中，淀粉酶较正常血脂ANP降低而GRP78表达增强。研究提示高脂血症通过多种途径引起胰腺损伤；高脂血症对ANP的损伤加重机制与AEP不同；内质网应激参与了HLP的发病过程； GRP78、HSP60、二硫化物异构酶和钙网蛋白可能作为SAP早期预警和预后判断指标。.通过代谢组学、蛋白组学在HLP中的应用，可以鉴定新的生物标志物，结合功能途径的趋势分析，可以发现与功能相关的等位改变。