受体肠源性肥大细胞在肝移植抗体介导排斥反应中促进肝窦内皮细胞损伤并进而损伤移植肝的机制

Primarily caused by endothelial cell damage,Antibody mediated rejection (AMR) after liver transplantation is agnored until recently. The exact mechanism is still unkown. The role of mast cell (MC) in immunology has been futherly recognized recent years. Our previous work showed that resident MC in donor liver plays as a protector by inducing immune tolerance.In the meanwhile, we found that MCs in the bowels of recipients not only degranulate but also the degree of the degranulation correlates with the severity of damage in the transplanted livers.The result may reveal that MCs play a role in AMR. We hypotheize the mechanism of MCs in AMR as follows: C3a and C5a which are released by complement system activation in AMR,arrive to bowel through circulation and conjugate with their G protein coupled receptors to trigger MC degranulation; mast cell tryptase (MCT) released by MC degranulation is confluent and arrives to liver through portal vein,and then activate proteinase on the surface of liver sinusoidal epithelial cells (LSEC) to upregulate adhesive molecules of LSECs and so on;These molecules can cause leukocyte inflitration and microthrombus formation;Upregulation of major histocompatabile complex (MHC)I antigen expression promoting the damage of liver by AMR.From the view of close relationship between liver and bowel, We aim to discover the mechanism of MC degranulation in promoting liver damage in AMR and find a new method to alleviate the damage of transplanted liver.

肝移植术后的抗体介导的排斥损伤（AMR）一直未受重视，其首发效应是移植物血管内皮细胞的损伤，机制不明。肥大细胞在移植免疫中的作用正被深入认识，课题组前期阐明了供肝肥大细胞介导免疫耐受在移植物保护中的重要作用，进而发现术后受体肠管富集的肥大细胞发生脱颗粒且跟供肝损伤严重程度正相关，提示受体肥大细胞可能参与AMR。其机制可能是：移植后激活补体系统释放活性片段C3a、C5a，经体循环到肠管，结合肠管肥大细胞表面G蛋白偶联受体引起脱颗粒；释放的胰蛋白酶经门静脉汇至肝脏，与肝窦内皮细胞表面蛋白酶受体结合，上调内皮细胞粘附分子等表达，促进白细胞浸润和微血栓形成；上调MHCI类抗原表达，最终促进AMR损伤移植肝。该研究从受体内功能联系密切的肝和肠联合考虑的全新视角，探讨肠管肥大细胞参与AMR对移植物损伤作用的机制，以期阐明肥大细胞介导免疫排异损伤的重要作用，为减轻移植物损伤寻找新的靶点提供理论依据。

肥大细胞（MC）是组织驻留的效应细胞，可能是在组织损伤中释放特异性的介质的最早反应者。然而，MC在肝脏移植免疫中的功能如何仍然需要我们去发现和探究其机制。肝脏缺血再灌注（I/R）损伤是肝移植后不能不面临的挑战，我们的研究发现在肝脏I/R以后胃肠道MC被激活并脱颗粒，这使得我们聚焦于胃肠道MC是如何被激活，以及胃肠道MC脱颗粒对肝I/R损伤的作用以及其机制。为了阐明胃肠MC颗粒在肝损伤中的生物学作用，我们采用了肝脏I / R模型。我们在I / R期间检测到胃肠道黏膜充血，MC增多并发生脱颗粒。随后我们通过细胞实验和动物模型进一步表明MC脱颗粒主要增强I / R肝脏炎症损伤的周期，包括肝窦内皮细胞（LSEC）死亡，中性粒细胞浸润和中性粒细胞胞外陷阱的形成，黏附分子的上调，炎症细胞因子和趋化因子释放，和氧化应激。而类胰蛋白酶（tryptase）是MCs脱颗粒的主要蛋白酶，其受体 - 蛋白酶激活受体2（PAR-2）在内皮细胞中广泛表达。之前的研究尚不清楚tryptase/ PAR-2轴是否以及如何参与肝脏IR。通过我们进一步的研究发现tryptase在肝脏IR期间积聚在循环中并且与肝脏损伤正相关。tryptase抑制剂可以显着下调粘附分子的表达，减少肝脏中的中性粒细胞浸润。炎症因子和趋化因子的水平也与肝脏的病理变化一致。此外，在MC缺陷小鼠中用外源tryptase处理可诱导在肝IR中在野生型小鼠中观察到的损伤。在体外，肝窦内皮细胞（LSECs）的PAR-2表达受类胰蛋白酶活性调节，涉及粘附分子表达以调节依赖于NF-κB途径的中性粒细胞粘附。总之，我们通过一些列研究探究胃肠道MC如何激活并诠释其脱颗粒产物tryptase远程分泌与LSEC作用并导致肝I/R损伤加重的机制。