饮水中二溴乙酸诱导T淋巴细胞凋亡的MAPK信号途径研究

水的氯化消毒过程中产生了一些的副产物，包括三氯甲烷和卤乙酸等，对人类的健康具有很大的危害，其中二溴乙酸是卤乙酸的一种，因其具有较强的致癌和致突变作用，近年倍受学者关注。现经初步研究发现其对生殖系统、神经系统和免疫系统具有毒性作用，但目前对此研究较少。本实验室对二溴乙酸的免疫毒性做了基础性研究，发现可以抑制免疫细胞的活性，诱发其发生凋亡。为了深入探讨二溴乙酸引起免疫细胞凋亡的确切机制，尤其是对信号转导的影响，本研究通过对BALB/c小鼠胸腺细胞进行体外培养，并作为靶细胞对其进行染毒， 从形态学、生物化学和分子生物学等多方面检测细胞凋亡所发生的改变，并重点探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号的三条传导途径在此凋亡过程中的作用，以找到和发现二溴乙酸对免疫细胞损伤的确切机制，为二溴乙酸的免疫毒理学研究提供更深入、准确地科学依据。

饮用水的安全问题是全世界共同关注的重要问题之一，目前饮用水的消毒有很多种方法如氯化消毒、臭氧消毒，氯胺消毒等，无论是用哪种方式消毒都会产生许多副产物，而这些副产物也都对人体具有致癌等毒副作用。本研究以水的一种消毒副产物—二溴乙酸为受试物，以小鼠胸腺内T细胞和T淋巴细胞系Cl.Ly1+2-/9为靶细胞，通过向靶细胞中加入不同浓度的二溴乙酸，培养不同的时间，对T细胞的增殖、凋亡并重点探讨MAPKs信号途径重的重要蛋白和核转录因子进行检测，探讨二溴乙酸对T淋巴细胞的损伤机制。结果发现：二溴乙酸可以抑制T淋巴细胞的体外增殖功能，诱导T淋巴细胞发生凋亡，引起T淋巴细胞钙离子内流增加、细胞周期性分裂的G0/G1期阻滞。在MAPK信号途径的研究中，发现二溴乙酸（尤其是浓度在0.1，0.5，1和5μmol/L剂量范围内）可引起磷酸化p38、ERK和JNK蛋白表达明显增加，加入各信号通路的阻断剂后，p38、ERK磷酸化蛋白的表达与对照组的差异不是很大，但JNK通路中阻断后磷酸化JNK蛋白下降不是很明显，而且各通路中下游的核转录因子表达也发生了改变，说明二溴乙酸对T淋巴细胞具有明显的细胞毒性作用，可以诱导细胞凋亡，MAPKs信号途径在此过程中发挥了重要作用（尤其是p38MAPK和ERK1/2途径）。经过基因芯片的检测发现二溴乙酸可导致多个与细胞增殖、分化的通路中大量基因表达改变（上调或下调）。.本课题基本按照计划书完成，在中文核心期刊发表文章1篇，1篇英文文章正在审稿中，还有1篇尚在初稿中。