LNK：三阴性乳腺癌发生发展的新机制

Due to the characters of low degree of differentiation, high heterogeneity, serious metastasis ability, high recurrence frequency, and importantly the ineffective therapeutic target, triple-negative breast cancer(TNBC) becomes one difficult trouble of breast cancer clinical treatment. LNK is significantly down-regulated in TNBC, identified from differential gene expression profile between TNBC tissue and non-TNBC tissue. Previous study showed that over-expression of LNK in TNBC cells could inhibit the growth ability; infection of mammary glands of LNK knockout mouse with retrovirus (replication-competent avian sarcoma-leukosis virus, RCAS) vector, the mammary epithelial cells are more proliferation; p-JAK2 is down-regulated via LNK overexpression, which indicate that JAK2 might be the singnaling pathway by LNK regulated. This study will confirm the role of LNK, using overexpression and knock down strategies in the breast cancer cells which differentially express ER, PR, or Her-2, playing in the TNBC proliferation progression by analyzing the cell behavior and molecular characteristics; we will also use RCAS into mammary glands of LNK knockout mouse initiating carcinogenesis to evaluating the effect of LNK on TNBC cells growth; subsequently clarify the underlying mechanism between LNK and JAK2-STAT3. Up to now, there was no report about the function and mechanism of LNK in regulating the TNBC growth progression. The innovative proposal by this study could possibly find a new target for the targeted therapeutics of TNBC.

三阴性乳腺癌是一类肿瘤分化程度低、异质性高、复发转移率高的肿瘤，因缺乏有效的治疗靶点而成为乳腺癌的治疗难题。LNK是我们采用基因芯片筛选三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织中差异表达基因时发现、低表达于三阴性乳腺癌的基因。前期研究发现，LNK在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中过表达可抑制其增殖能力；LNK基因敲除小鼠乳管内注射RCAS其乳腺上皮增生活跃；LNK过表达后p-JAK2表达下调,初步确定LNK调控JAK2信号通路。本研究拟取受体表达状态不同的乳腺癌细胞，采用过表达、沉默策略，从细胞行为及分子特征方面，明确LNK在三阴性乳腺癌增殖过程中的功能；通过LNK基因敲除小鼠诱导三阴性乳腺癌，明确LNK在三阴性乳腺癌发生发展中的功能；以JAK2-STAT3为机制研究切入点，揭示LNK可能的作用机制。本研究具有源头创新性，将有助于理解三阴性乳腺癌发生发展的分子机制，为其靶向治疗提供新的靶点。

研究背景：三阴性乳腺癌是一类肿瘤分化程度低、异质性高、复发转移率高的肿瘤，因缺乏有效的治疗靶点而成为乳腺癌的治疗难题。LNK是我们采用基因芯片筛选三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织中差异表达基因时发现、低表达于三阴性乳腺癌的基因。前期研究发现，LNK与三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移、侵袭及增殖能力有关；预测其通过调控JAK-STAT信号通路调控乳腺癌的功能。研究内容：（1）免疫组化明确LNK（SH2B3）在各类型乳腺病变中的表达水平；（2）数据库分析LNK（SH2B3）在肿瘤细胞、组织的表达及与临床的相关性；（3）比较LNK（SH2B3）在不同乳腺癌细胞株的差异表达；（4）慢病毒构建LNK（SH2B3）稳定过表达和沉默的乳腺癌细胞系；（5）评价LNK（SH2B3）对乳腺癌细胞凋亡、周期、增殖及迁移等表型的影响；（6）探讨LNK（SH2B3）影响乳腺癌表型的相关分子机制；（7）体内检测LNK对乳腺癌生长的作用研究。重要研究结果：（1）免疫组化结果提示LNK在三阴性乳腺癌中表达较低；（2）数据库分析LNK在乳腺癌组织中表达低，且LNK过表达预示乳腺癌预后不良；（3）LNK对细胞周期及细胞凋亡无明确作用；（4）LNK可促进乳腺癌细胞增殖及迁移；（5）LNK主要激活p-ERK1/2通路、p-STAT5通路、p-AKT通路及p-STAT3通路，从而促进乳腺癌细胞增殖及迁移能力；（6）体内实验表明，LNK在三阴性乳腺癌细胞中过表达，可使乳腺癌皮下脂肪垫原位移植瘤生长明显增快、体积增大。关键数据：此项目研究过程中，我们发现LNK在三阴性乳腺癌中的表达存在差异性，且其过表达与乳腺癌细胞的增殖及迁移存在正相关。同时，在体实验过程中，我们发现LNK在三阴性乳腺癌中过表达后，可明显加快肿瘤体积的增大。科学意义：LNK可能与三阴性乳腺癌异质性存在特殊的联系，通过LNK的表达水平或可以预测三阴性乳腺癌的预后，为三阴性乳腺癌的个体化治疗提供理论依据。