肝受体类似物（Liver Receptor Homolog 1, LRH 1)在雌鼠生殖过程中的作用及其机制

肝受体类似物 1（LRH1)对于胚胎发育、胆固醇代谢非常重要。卵巢中LRH1在颗粒细胞、黄体细胞中高水平表达。Lrh1在基因组中被敲除后,胚胎死亡；Lrh1仅在颗粒细胞中被敲除后，小鼠不育。但LRH1在黄体中的作用尚不清楚。申请人拟利用条件基因敲除（CKO）小鼠(Prcre/+;Lrh1fl/fl),在黄体中敲掉Lrh1。初步研究发现，CKO小鼠不育，但能排卵并形成黄体;且孕鼠的孕酮浓度很低。激光显微切割（laser Microdissection）技术分离黄体进行的qPCR结果表明，Lrh1及孕酮合成的关键基因Cyp11a1, Star, Hsd3b表达量大为下降。同时申请人首次发现LRH1 在孕鼠子宫中表达，并在CKO孕鼠的子宫被敲除。本申请拟在前期研究的基础上，进一步研究LRH1在黄体，妊娠子宫中的作用，为将LRH1作为治疗女性不孕不育用药靶点及对于生育调控途径的探索都有深远的意义。

肝受体类似物 1（LRH1)对于胚胎发育、胆固醇代谢、卵巢排卵至关重要。但LRH1在黄体及子宫中的作用未明。为此，我们利用条件基因敲除技术将小鼠Lrh1从黄体及子宫中敲除，发现黄体内孕激素合成的关键基因Cyp11a1, Star, Hsd3b及胆固醇转运相关基因SrB1, Ldlr的表达下调，使得孕酮浓度显著降低，导致小鼠不能妊娠。但雌激素没有受到影响，因而小鼠能够发情、交配，同时前列腺素合成相关基因变化不明显，使得基因敲除的小鼠能够正常排卵，卵子也能正常发育。此外黄体内血管发生相关基因（Vegfa及其受体Vegfr1，Vegfr2；促血管生成素Angpt1）表达量显著降低，导致CKO小鼠黄体体积变小。交配过的CKO雌鼠孕酮低，小鼠不孕不育，通过孕酮栓剂补充孕酮后，孕酮浓度恢复，小鼠能够怀孕但是仍然不育。进一步的研究发现孕鼠子宫内膜基质细胞蜕膜反应障碍，使得胚胎、胎盘发育受阻，胎儿最后死亡。输卵管移植及卵巢移植实验进一步证实了CKO小鼠的不育是由于子宫内Lrh1的缺失导致的蜕膜化缺陷造成的，即Lrh1对于小鼠的妊娠及其维持是至关重要的。该基因的缺失导致不孕不育，其作用机制是影响孕酮的合成、胆固醇的转运及子宫内膜基质细胞的蜕膜化。