lncRNA-n419646通过TNK1调控STAT通路影响动脉粥样硬化炎症反应及机制

Inflammation has been considered to be the main reason for atherogenesis, which contribute to the whole process of atherosclerosis (AS). STAT signal play key roles in the inflammation of AS. The non-receptor tyrosine kinase 1(TNK1) participates in the STAT pathway and regulate the immune system and inflammation. However, whether the TNK1 and n419646 also play roles in AS are still unclear. LncRNAs are related to the pathogenesis of many diseases. Our previous studies found that in ApoE deficient mice which suffered AS, the lncRNA-n419646 decreased significantly, accompanied with a increase of TNK1 expression. Bioinformatics analysis indicated an obvious co-relationship between lncRNA-n419646 and TNK1. When inhibited by siRNA, the lncRNA-n419646 level decreased dramatically, which caused a enhancement of TNK1 level and STAT1/3 phosphorylation. Therefore, we speculate that lncRNA-n419646 may participate in the inflammatory process through TNK1 and STAT signal pathway. This research aim to verify this hypothesis by using molecular biological techniques, such as gene transfection and gene interference methods in both cells and animals. The lncRNA-n419646/TNK1-Tyk2/STAT signal pathway will be explored. Results of this research can provide a new idea and medical target for AS treatment.

动脉粥样硬化（AS）是一种慢性炎症性疾病。非受体酪氨酸激酶1（TNK1）参与了STAT通路并调控免疫炎症，但其是否参与AS形成及其机制不清。LncRNA与多种疾病相关，前期实验证实AS小鼠n419694明显下调，TNK1明显上调。生物信息学分析显示n419694与TNK1明显关联。n419646抑制可促进TNK1表达及STAT1/3磷酸化，因此推测n419646通过TNK1调控STAT通路影响AS炎症反应。本课题拟采用基因转染与干扰等分子生物学技术，首先在细胞水平观察n419646和TNK1对血管炎症反应及功能的影响，同时深入研究n419646与TNK1-Tyk2/STAT通路。并用AS小鼠确证n419646、TNK1和STAT通路在AS病理过程中的作用。本课题首次在分子、细胞和动物水平探讨n419646及TNK1在AS炎症反应中的作用及机制，研究成果可为AS防治提供思路和新靶点。

心脑血管疾病是目前世界上发病率和死亡率最高的疾病。在心脑血管疾病的众多诱因中，动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是冠心病、脑卒中、心肌梗死等心脑血管疾病的独立危险因素。动脉粥样硬化导致的心脑血管事件主要由斑块不稳定和破裂所致。动脉粥样硬化斑块分为两大类：一类是稳定型即纤维帽厚而脂质池较小的斑块；另一类是不稳定型又称“易损型斑块”。易损斑块脂质中心大、纤维帽薄、平滑肌细胞和胶原含量少、炎症细胞和炎症介质水平高，非常容易破裂。一旦斑块由稳定型发展为不稳定型，则容易破裂形成血栓，造成心脑血管事件发生。因此，如何有效稳定斑块，防止斑块破裂，是目前防治心脑血管急性事件研究的热点。.本研究筛选了动脉粥样硬化小鼠和人体组织样本中的lncRNA的表达改变情况，首先以芯片法筛选高脂喂养的ApoE(-/-)小鼠主动脉组织中差异表达的lncRNA和mRNA；收集人颈动脉内膜剥离术（CEA）获取到动脉粥样硬化斑块样本，和GEO数据库中筛选含易损斑块和稳定斑块的芯片数据集，并利用生物信息学的方法进行分析，在人体样本中对结果进行验证，采用细胞和分子生物学技术深入研究lncRNA的作用机制。结果发现：1）TNK1及下游的Tyk2/STAT1通路是介导动脉粥样硬化炎症反应的重要通路，在动脉粥样硬化的炎症反应中其重要作用；2）长链非编码RNA LINC00657在oxLDL处理的内皮细胞中，可作为分子海绵，吸附miR-590-3p，促进下游HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9的表达水平，进而促进斑块内血管新生；3）在人易损斑块和稳定斑块中，EFEMP1, BGN, ELN, FMOD, DKK3, FBLN5, FZD6, HLA-DRA, HLA-DMB, HLA-DMA, and RILP 与斑块的稳定性密切相关。本研究明确了LINC00657、TNK1、Tyk2/STAT通路、及其他相关基因在动脉粥样硬化中的作用及机制，为评估LINC00657及TNK1是否可以作为防治AS一系列疾病的新靶点提供充分的理论基础。