VEGF和MMP-9在增生期血管瘤发生中的作用研究

Hemangiomas are the most common benign tumor of infants and young children, not only affects the appearance, but also affect the physiological function. Even part of the lesion due to ulcers, infection, bleeding, heart failure, high flow diversion or special parts is life-threatening. So far, its exact pathogenesis remains unclear and no successful treatment modality exists. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinase 9 (MMP9) are closely related to hemangioma vascular proliferation. We hypothesized that VEGF and MMP9 in proliferating hemangiomas rapid development play a very important role, reduced VEGF and MMP9 gene expression of vascular tumors may have a therapeutic effect. We intend to prepare hemangioma xenograft models. Using VEGF and MMP9 gene RNAi as a tool to decrease the expression of VEGF and MMP9 can be possibly effective. Improving endothelial progenitor cells doctrine, and VEGF and MMP9 gene through RNAi silencing may explore new control methods of proliferation hemangiomas formation.

血管瘤是婴幼儿最常见的良性肿瘤，不仅影响美观，影响生理功能，甚至一部分病变因溃疡、感染、出血、高流量分流性心衰或特殊部位而危及生命。迄今为止，对其确切的发病机制仍不清楚，血管内皮细胞生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶9 (MMP9)与血管瘤的血管增生有密切关系。我们设想VEGF和MMP9在血管瘤增生期快速发展起非常重要的作用，下调VEGF和MMP9基因的表达，对血管瘤可能有治疗作用。我们拟制备血管瘤裸鼠移植模型，以VEGF基因和MMP9基因的RNAi为工具，下调VEGF和MMP9的表达，从VEGF和MMP-9两者的角度探讨血管瘤的发病机理，完善血管内皮祖细胞学说，通过VEGF和MMP9基因的RNAi沉默来探索新的血管瘤防治方法。

血管瘤是婴幼儿最常见的良性肿瘤，不仅影响美观，影响生理功能。迄今为止，对其确切的发病机制仍不清楚，血管内皮细胞生长因子（VEGF）与血管瘤的血管增生有密切关系。.建立人毛细血管瘤裸鼠移植模型，探讨血管瘤裸鼠模型建立的最佳条件。 将手术切除的1例雌激素受体阳性的儿童增生期血管瘤组织制成组织块，植入20只裸鼠皮下，每只4 处，将20只裸鼠分为4个实验组。实验1 组在移植后给予普通鼠食喂养；实验2 组在1组基础上每周肌注雌二醇0.01 mg；实验3组在1组基础上每周肌注雌二醇0.1 mg；实验4组在1组基础上每周肌注雌二醇1mg，于移植后第30、60、90天切取移植瘤。移植瘤标本进行病理学光镜检查，用血管内皮细胞单克隆抗体CD31、CD34进行免疫组化染色。移植后早期各组标本内皮细胞大量变性、坏死，30d 后，单纯喂养的实验1组及实验2组部分移植瘤开始吸收或形成脓肿及纤维化。实验3、4组移植瘤开始缓慢生长。90d后实验1组实验2组移植瘤均未成活，实验4组移植瘤部分成活，而实验3组移植瘤全部成活。我们因此得出结论，适量的应用雌激素可建立稳定的人血管瘤裸鼠移植动物模型。该模型可以应用到基础和临床的血管瘤研究。.培养人血管瘤内皮细胞，利用RNA干扰技术下调HemECs中VEGF的表达，观察其对血管瘤内皮细胞的影响。利用组织块法培养HemECs，鉴定、筛选和纯化后，分为A、B、C三组，分别为转染组，空脂质体组和对照组。利用脂质体法将pGCsiU6/Neo/dsRED-VEGF真核表达质粒转染到内皮细胞中。通过荧光显微镜大体观察转染效率和细胞生长情况、ELISA法检测细胞分泌VEGF蛋白和MTT法检测质粒转染对HemECs的影响。转染组培养上清中VEGF蛋白浓度在转染的第1、3、5、7天分别为141.3±7.82、92.34±5.71、68.07±5.95及40.65±6.71pg/ml。差异均有统计学差异（P＜0.05）。我们因此得出结论，转染后的细胞活性降低，转染组VEGF蛋白明显下降。这些都可以说明，VEGF在血管瘤内皮细胞生长、增殖之中起着非常重要的作用，这也为我们治疗血管瘤提供一个新的靶点。