对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)对白斑综合征病毒(WSSV)的干扰机制研究

白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是分布较广的2种对虾病毒，其中WSSV危害更为严重，目前仍未得到有效控制。IHHNV对WSSV的干扰作用已得到证实，这是甲壳动物中病毒干扰的首例，但其干扰作用的机制尚不清楚。本课题将对这2种病毒的干扰效果进行量化研究，以确定最佳干扰效果时IHHNV与WSSV的量化关系；同时采用病毒与细胞膜的体外结合、抑制消减杂交(SSH)和差异杂交(DH)等技术研究IHHNV对WSSV干扰中的受体结合抑制及基因表达情况，以阐明IHHNV对WSSV的干扰机制，为WSSV的防治提供新的视点。

白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是分布较广的两种对虾病毒，IHHNV对WSSV的干扰作用已得到证实，但其干扰作用的机制尚不清楚。本课题初步阐明了IHHNV对WSSV的干扰机制，为WSSV的防治提供了新的视点。本课题主要研究内容如下：(1) 凡纳滨对虾携带IHHNV和WSSV的PCR检测：对采自烟台不同养殖区域的43份凡纳滨对虾样品进行了WSSV和IHHNV的PCR检测，结果表明，31份样品感染了一种或两种病毒，病毒感染率达72％；24个样品同时感染了WSSV和IHHNV两种病毒，占检测样品总数的56%。该检测结果说明，WSSV和IHHNV仍然是目前严重危害凡纳滨对虾养殖的对虾病毒，且凡纳滨对虾同时感染WSSV和IHHNV的情况较为普遍。(2) PCR双重及单独检测WSSV和IHHNV的灵敏度研究：对WSSV和IHHNV进行PCR双重和单独检测，结果表明，双重检测两种病毒的灵敏度要略低于单独检测一种病毒。（3）中国IHHNV株系研究：采用7对引物对感染了IHHNV的病虾组织DNA进行PCR检测。这些引物分为两类，一类扩增感染性IHHNV呈阳性，另一类扩增非感染性IHHNV呈阳性。结果显示，病虾组织DNA 经IHHNV感染性引物的PCR扩增结果呈阳性，非可感染性引物的PCR扩增结果则为阴性。结果表明我国对虾感染的IHHNV属于感染性病毒株。（4）IHHNV与WSSV竞争抑制研究：利用凡纳滨对虾的鳃细胞膜与病毒体外结合的方法，研究了IHHNV和WSSV的相互干扰作用，结果表明，IHHNV对WSSV的干扰作用可能是竞争对虾细胞膜上的共同受体。（5）感染不同量WSSV和IHHNV的凡纳滨对虾转录组测序：对感染不同量WSSV和IHHNV的凡纳滨对虾的鳃和肝胰脏进行了转录组高通量测序，对其差异表达基因及其功能、代谢通路进行了分析，从分子水平阐明了IHHNV对WSSV的干扰机制。